蝙蝠葛堿對(duì)阿爾茨海默病小鼠海馬組織Aβ水平的影響

費(fèi)洪新等

摘 要：目的：研究中藥提純成分蝙蝠葛堿對(duì)阿爾茨海默病小鼠海馬組織Aβ水平的影響。方法：阿爾茨海默病小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、模型組、治療組、蝙蝠葛堿組。給予蝙蝠葛堿灌胃，觀察小鼠Aβ的變化。結(jié)果：與模型組比較后，蝙蝠葛堿組Aβ水平明顯降低。結(jié)論：蝙蝠葛堿能降低Aβ水平，對(duì)阿爾茨海默病小鼠具有一定的海馬組織保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：蝙蝠葛堿；阿爾茨海默?。恍∈?/p>

蝙蝠葛堿（Dauricine，DAU）是祖國(guó)醫(yī)藥北豆根植物的提純有效成分單體，具有廣泛的藥理作用，包括抗氧化作用[1]、腦缺血保護(hù)作用[2-3]等?；诖藢?shí)驗(yàn)開展DAU對(duì)腦部疾病阿爾茨海默病（Alzheimer's disease，AD）海馬組織密切相關(guān)的因子、淀粉樣斑塊核心成分、即β-淀粉樣蛋白（Amyloid beda，Aβ）[4]的研究，研究DAU對(duì)AD小鼠Aβ的影響作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

3月齡標(biāo)準(zhǔn)體重APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠和同月齡、同背景C57小鼠，常溫、常濕、自由攝取食物，飼養(yǎng)在黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2 藥物

西藥陽(yáng)性對(duì)照吡拉西坦購(gòu)于湖南迪諾制藥有限公司（批號(hào)130325）；DAU購(gòu)于MUST公司，批號(hào)MUST-13010313，純度為98.66%；Aβ酶聯(lián)免疫試劑盒（批號(hào)20140401），南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

2 方法

2.1 分組

AD小鼠共18只，隨機(jī)分為3組，其中模型組6只、治療組6只、DAU組6只；另設(shè)定對(duì)照組6只。

2.2 給藥

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)照組小鼠6只給予生理鹽水灌胃；模型組6只給予生理鹽水灌胃；治療組6只給予吡拉西坦（0.62gokg-1·d-1）灌胃；DAU組6只給予DAU（20mgokg-1·d-1）灌胃，灌胃時(shí)間為2周。

2.3 Aβ檢測(cè)

小鼠斷頭、取海馬組織、勻漿、靜置、離心、分裝、-20℃低溫保存?zhèn)溆?。按Aβ酶聯(lián)免疫試劑盒說明書操作進(jìn)行，450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔OD值，記錄并且分析數(shù)據(jù)。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

實(shí)驗(yàn)采用SPSS19.0軟件分析處理，單因素方差分析實(shí)驗(yàn)的原始數(shù)據(jù)。

3 結(jié)果

3.1 動(dòng)物海馬組織Aβ的檢測(cè)

DAU對(duì)AD小鼠海馬Aβ影響的結(jié)果采用x±s表示，單位pg/ml。實(shí)驗(yàn)中與對(duì)照組（260.6825±40.3829）比較的過程中，模型組小鼠海馬組織Aβ的含量（410.0873±36.4436）較高（P<0.05），說明模型建立成功，模型穩(wěn)定；經(jīng)過治療后與模型組比較，治療組（280.7222±44.0904）、DAU組（310.6429±29.8401）小鼠海馬組織Aβ的含量較低（P<0.05），說明DAU對(duì)AD小鼠的AD癥狀顯著改善，提示DAU對(duì)AD的治療效果較好；治療組（280.7222±44.0904）與DAU組（310.6429±29.8401）比較，小鼠海馬組織Aβ的含量相當(dāng)（P>0.05），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明西藥吡拉西坦與中藥的提純成分DAU二者比較無顯著差異。

4 討論

AD是一種進(jìn)行性腦組織功能減退的、腦組織迅速老化的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，表現(xiàn)為患者記憶力的下降，認(rèn)知能力的下降，在老年人的人群中高發(fā)，其主要的病理改變?cè)谀X組織老年斑的沉積，在老年斑中的核心成分主要是Aβ的沉積、神經(jīng)元數(shù)量的減少、神經(jīng)原纖維纏結(jié)進(jìn)而形成老年斑[5]。人的年齡在不斷增長(zhǎng)，老化大腦出現(xiàn)神經(jīng)元數(shù)目減少的區(qū)域主要集中在海馬、皮質(zhì)等區(qū)域[6]。

實(shí)驗(yàn)主要對(duì)AD密切相關(guān)的因子、AD發(fā)病中心環(huán)節(jié)、老年斑的核心成分Aβ進(jìn)行了檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)中與對(duì)照組比較的過程中，模型組小鼠海馬組織Aβ的含量（410.0873±36.4436）較高（P<0.05），說明模型建立成功，模型穩(wěn)定；經(jīng)過治療后與模型組比較，治療組、DAU組小鼠海馬組織Aβ的含量較低（P<0.05），說明DAU對(duì)改善AD小鼠的AD癥狀顯著，提示DAU對(duì)AD治療效果較好；治療組與DAU組比較，小鼠海馬組織Aβ的含量相當(dāng)（P>0.05），說明西藥吡拉西坦與中藥的提純成分DAU二者比較無顯著差異。

綜上所述，DAU可以降低Aβ的水平，減輕AD患者的臨床癥狀，從而保護(hù)AD小鼠的海馬組織結(jié)構(gòu)，延緩機(jī)體的老化，延長(zhǎng)人們的壽命。

參考文獻(xiàn)

[1]何麗婭，李立中，吳基良.蝙蝠葛堿的抗氧化實(shí)驗(yàn)研究[J].中草藥，1997，28（8）：479-481.

[2]李艷紅，黃向江，盧浩浩.蝙蝠葛堿對(duì)大鼠局灶性腦缺血及線粒體氧化損傷的保護(hù)作用[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2005，34（3）：270-273.

[3]李艷紅，龔培力.蝙蝠葛堿對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腦缺血的保護(hù)作用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2004，20（5）：564-567.

[4]Wu Y L，Xin X J，Xin X L，et al.Research progress about the regulation of GXXXG structures in the Alzheimer-related protein[J].Chin Pharmacol Bull，2011，27（1）：1-4.

[5]Mohandas E，Rajmohan V，Raghunath B.Neurobiology of Alzheimer's disease[J].Indian Journal of Psychiatry.2009，51（1）：55-61.

[6]Rossi L，Mazzitelli S，Arciello M，et al.Benefits from dietary polyphenols for brain aging and Alzheimer's disease[J].Neurochem Res，2008，33（12）：2390-2400.

作者簡(jiǎn)介：費(fèi)洪新（1978-），男，黑龍江佳木斯人，在讀博士，講師，從事癡呆、痛風(fēng)、腫瘤研究。

通訊作者：周忠光（1957-），男，黑龍江哈爾濱人，博士，教授，博導(dǎo)，從事癡呆、痛風(fēng)、腫瘤研究。