腺病毒載體，最有潛力的心血管疾病治療載體？

郝嘉，游凱，肖穎彬

（第三軍醫(yī)大學 新橋醫(yī)院全軍心血管外科中心，重慶 400037）

對心血管疾病進行基因治療，需高效的基因轉(zhuǎn)移載體和轉(zhuǎn)移體系將目的基因?qū)胄难埽踩煽康乇磉_。腺病毒是目前廣泛應(yīng)用于心血管基因轉(zhuǎn)移的病毒載體，腺病毒不僅可感染增殖的細胞，亦感染非增殖的細胞，因此，腺病毒載體最適合于心血管系統(tǒng)的基因轉(zhuǎn)移，目前它已進入臨床III期治療，它應(yīng)用于心血管疾病的防治已近于現(xiàn)實［1］。本文綜述腺病毒載體的性質(zhì)、優(yōu)點及發(fā)展歷程，在心血管疾病中的具體應(yīng)用，總結(jié)目前應(yīng)用中的障礙和改進策略。

1 腺病毒的基本結(jié)構(gòu)及感染機理

腺病毒是無包膜的線性雙鏈DNA病毒，毒粒直徑為60~90 nm，長約36 kb，由20面體的蛋白質(zhì)外殼和蛋白核酸復(fù)合核心組成。它由于存在殼蛋白因而可逃避細胞內(nèi)溶酶體的消化。基因組有編碼區(qū)和非編碼區(qū)兩部分。在編碼區(qū)，根據(jù)DNA復(fù)制周期的不同分為早期基因區(qū)和晚期基因區(qū)，前者有E1～E4區(qū)，為早期轉(zhuǎn)錄元，主要編碼病毒的調(diào)節(jié)蛋白；后者分為L1～L5五個區(qū)，為晚期轉(zhuǎn)錄元，負責結(jié)構(gòu)蛋白編碼。大多數(shù)腺病毒載體是用腺病毒2型和腺病毒5型構(gòu)建而來，有潛在臨床應(yīng)用價值的載體絕大多數(shù)來源于腺病毒5型［2］。腺病毒感染的機制是進入細胞后先粘附初級受體，然后與次級受體相互作用而內(nèi)化。病毒包裹在網(wǎng)格蛋白形成的小囊泡中進入細胞，并被運輸?shù)絻?nèi)涵體，通過酸化作用去掉衣殼蛋白，脫殼的病毒顆粒侵入細胞質(zhì)，再被轉(zhuǎn)運到細胞核進行復(fù)制。

2 腺病毒載體的優(yōu)點

腺病毒作為基因感染的載體雖存在某些不足，如表達時間較短和感染器官的炎癥反應(yīng)等，但腺病毒載體仍是極有潛力的外源基因的運載工具，它的優(yōu)點主要有［3］：

（1）靶細胞范圍廣，不僅能感染復(fù)制分裂細胞，也能感染非分裂細胞，它可介導(dǎo)體內(nèi)多種組織的基因轉(zhuǎn)移；

（2）攜帶的外源DNA片段大（最大可至35 kb）；

（3）感染效率高。腺病毒載體所攜帶的外源基因在體外對血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞的感染效率均達100%，體內(nèi)感染效率可達15%~80%。每10 mm2血管壁上約可感染5 000~10 000個細胞，約為脂質(zhì)體和逆轉(zhuǎn)錄病毒的100倍；

（4）重組病毒產(chǎn)量滴度高，可達1011～1012 pfu/ml，慢病毒載體無此特點；

（5）人類是腺病毒的自然宿主，腺病毒也可作為活疫苗應(yīng)用，對接種者無明顯的毒副作用。它進入細胞內(nèi)僅瞬間表達，不整合到宿主細胞基因組，安全性明顯高于慢病毒載體。腺病毒載體表達持續(xù)時間較短的這種特性在心血管疾病基因治療中十分有益，比如用它轉(zhuǎn)移血管生成因子足以誘導(dǎo)局部血管再生，也不至于引起血管的過度形成；

（6）腺病毒作為真核系統(tǒng)基因調(diào)控模型，其基因組結(jié)構(gòu)和功能已有較廣泛深入的研究，且理化性質(zhì)相對穩(wěn)定，容易制備，這一點明顯優(yōu)于慢病毒載體；

（7）載體沒有包膜，不易被補體滅活，能直接在體內(nèi)應(yīng)用，且可由靜脈注射、腸道吸收或氣管內(nèi)滴注等多種方式給予。

3 腺病毒載體的發(fā)展過程

（1）第一代腺病毒載體為E1或E3基因缺失，缺失區(qū)插入外源治療基因，其優(yōu)點有：在體外的生產(chǎn)效價很高，易感的宿主細胞范圍廣，病毒基因組整合于細胞染色體外，可避免插入誘變的可能。但此型載體可引發(fā)機體產(chǎn)生強烈的炎癥反應(yīng)或免疫反應(yīng)，且表達外源基因的時間較短導(dǎo)致應(yīng)用受限。

（2）為解決第一代病毒載體生產(chǎn)中出現(xiàn)的問題，并提高插入基因的量，同時去除E1區(qū)和E4區(qū)成為第二代腺病毒載體。宿主的免疫反應(yīng)性和炎癥反應(yīng)減輕，在載體容量和安全性方面也有較大改進。然而，第二代腺病毒仍不能避免殘余病毒基因表達物在體內(nèi)的免疫反應(yīng)和細胞毒性，導(dǎo)致基因表達的時間有限。

（3）前兩代腺病毒的主要弊病在于載體基本結(jié)構(gòu)中的病毒結(jié)構(gòu)基因，第三代載體把它們?nèi)咳コ槐Ａ粝俨《颈匦璧捻樖阶饔迷盎蚪M兩端的末端倒置反向重復(fù)DNA序列和包裝信號順序，全長不到1 kb。基因全缺失的腺病毒載體（也稱無病毒載體、輔助病毒依賴性腺病毒或裸腺病毒）；大部分腺病毒基因缺失的載體稱為微型腺病毒載體。第三代腺病毒載體包括攜帶目的基因載體部分、輔助病毒（反式提供病毒復(fù)制包裝等）和感受態(tài)細胞株（病毒包裝的場所）。常借助填充片段DNA（如λ-噬菌體、酵母、細菌、非人源DNA以及次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶基因內(nèi)含子序列）完成基因組大小的殼體化。第三代腺病毒載體引起的細胞毒性和免疫原性大幅度減弱，在它的載體中引入核基質(zhì)附著區(qū)基因可使外源基因保持長期表達（最長達10個月以上），并可增加穩(wěn)定性。目前仍在不斷改進，如RAPAd2腺病毒系統(tǒng)、Ad35 載體等［4］。

4 腺病毒載體在心血管疾病中的應(yīng)用研究

（1）腺病毒載體在心肌缺血中的應(yīng)用研究

在豬心肌缺血模型中，Grines等［5］構(gòu)建編碼成纖維細胞生長因子-4的復(fù)制缺陷型人5型腺病毒載體，經(jīng)冠狀動脈內(nèi)注射后，可顯著改善心肌收縮功能和心肌缺血部位局部血流狀況，這種作用在2 w時最明顯，且可持續(xù)12 w，并沒有發(fā)現(xiàn)明顯副作用。在大鼠左冠前降支結(jié)扎模型中血管腔內(nèi)注入鞘氨醇激酶腺病毒載體，可促進新生血管形成和減少心肌纖維化，從而有效地防止缺血再灌注損傷和缺血后心力衰竭［6］。在γ射線心臟照射大鼠模型中，心肌內(nèi)注射入表達肝細胞生長因子的腺病毒載體，可顯著改善心肌血供和心臟功能，這種保護作用在照射180d 后也可觀察到［7，8］。Wei L 等通過腺病毒載體過表達無ODD區(qū)域的缺氧誘導(dǎo)因子，觀察對心臟移植時缺血再灌注損傷的保護作用，發(fā)現(xiàn)這種載體是觀察移植物功能障礙的有效工具［9］。在導(dǎo)入β腎上腺素的轉(zhuǎn)基因小鼠模型中，經(jīng)體循環(huán)注入編碼松弛素的腺病毒載體，可顯著改善心肌纖維化，且不影響其它器官正常的膠原水平［10］。在大鼠心肌梗塞模型中利用腺病毒載體導(dǎo)入人基質(zhì)細胞衍生因子1α，可抑制梗死部位的膠原合成和沉積，顯著改善心臟結(jié)構(gòu)和功能［11］。

Yuan B等［12］將18名冠心病分為3個組，每組6名，在接受冠脈搭橋術(shù)時心肌內(nèi)直接注射肝細胞生長因子腺病毒載體，按給予劑量分為3組，分別為5×108（低）、1.5 × 109（中）和 5×109（高），低、中、高 3組分別有3、5、6名的注射部位心肌灌注得以改善，且無明顯副作用。另一臨床實驗是在60例慢性穩(wěn)定性心絞痛病人中，經(jīng)冠脈內(nèi)注入攜帶成纖維細胞生長因子-4基因的腺病毒載體，治療后患者癥狀有所改善。

（2）腺病毒載體在血管再狹窄中的應(yīng)用研究

在患有冠心病的病人中，代償性側(cè)支血管并不足以改善組織缺血狀況，基因治療血管再狹窄一直是很誘人的手段［13］。治療性血管生成則是指引入外源的生血管因子，促進血管的形成，以改善缺血組織的血液供應(yīng)，治療性血管生成研究已進入臨床前和臨床試驗階段。血管再狹窄的基因治療多依賴于腺病毒介導(dǎo)的局部血管內(nèi)基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，相關(guān)的研究層出不窮。腺病毒載體轉(zhuǎn)移抗狹窄的基因作為冠狀動脈成形術(shù)時的輔助措施很合適，因為甚至短暫的血管平滑肌細胞增殖的抑制，就足以限制再狹窄損傷的形成，而減少外源基因可能產(chǎn)生的毒副作用。冠狀動脈內(nèi)注射的腺病毒只有1.3%外漏，且在肝臟、視網(wǎng)膜和骨骼肌未測到病毒DNA，局部未觀察到炎癥反應(yīng)、細胞壞死和纖維化。主要的研究結(jié)果有：

①氣囊損傷頸動脈模型研究

在氣囊損傷兔頸動脈模型中，腺病毒介導(dǎo)的生長終止特異性同源盒基因感染頸動脈，可阻止血管平滑肌細胞停止在G0期，減少新內(nèi)膜增生和血管腔狹窄。攜帶堿性成纖維細胞生長因子基因的重組腺病毒干預(yù)氣囊損傷大鼠頸動脈，2 w觀察到明顯的劑量依賴性內(nèi)膜和中膜面積比值降低，同時在兔股動脈損傷模型感染該載體，也觀察到相似結(jié)果。用腺病毒載體將具有免疫調(diào)節(jié)特性的Fas蛋白配體感染氣囊損傷的頸動脈，可抑制血管進一步損害，誘導(dǎo)中膜血管平滑肌細胞凋亡和抑制內(nèi)膜增生（60%）。用腺病毒載體局部轉(zhuǎn)移iNOS于豬冠狀動脈成形術(shù)后內(nèi)膜，亦明顯抑制其內(nèi)膜增生（52%）。

腺病毒介導(dǎo)一氧化氮合酶感染體外培養(yǎng)血管平滑肌細胞，發(fā)現(xiàn)一氧化氮表達較對照組高100倍，體內(nèi)實驗應(yīng)用于損傷大鼠頸動脈，使新內(nèi)膜形成幾乎全部被抑制（>95%），可持續(xù)6 w。針對損傷大鼠頸動脈的體內(nèi)實驗中，用腺病毒轉(zhuǎn)移編碼G蛋白βγ亞基信號的多肽抑制劑基因（血管平滑肌細胞增殖相關(guān)基因），感染該載體后可顯著減少血管內(nèi)膜增生（70%）。用腺病毒載體轉(zhuǎn)移P53基因于大鼠損傷頸動脈，發(fā)現(xiàn)新內(nèi)膜形成顯著減少，且呈劑量依賴性。腺病毒介導(dǎo)的GATA-6局部轉(zhuǎn)移至氣囊損傷血管壁，使損傷的GATA-6的下調(diào)逆轉(zhuǎn)來促進血管平滑肌細胞分化且能抑制大鼠頸動脈內(nèi)膜的增生。

②頸動脈基礎(chǔ)研究

用腺病毒將胸腺嘧啶激酶基因在損傷后立即或1 w內(nèi)轉(zhuǎn)入大鼠頸動脈、豬髂動脈及粥樣硬化性兔髂動脈來抑制血管平滑肌細胞增殖，I/M比值降低，新內(nèi)膜增生減少40%~60%。過表達谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的腺病毒載體導(dǎo)入頸動脈中可保護血管壁氧化損傷，并防止兔頸動脈移植橋動脈粥樣斑塊形成［14］。用腺病毒載體介導(dǎo)的人金屬蛋白酶組織抑制劑cDNA感染大鼠血管平滑肌細胞，其基質(zhì)金屬蛋白酶依賴的遷移下降，新內(nèi)膜面積減少。將攜帶尿激酶纖溶酶原激動劑的第三代腺病毒載體注射到兔子頸動脈中，發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細胞內(nèi)持續(xù)高水平表達該外源基因，宿主的免疫炎癥反應(yīng)較低，治療基因的表達水平比內(nèi)源性表達高3倍，提示其可較好地應(yīng)用于血管疾病的治療。

③大隱靜脈橋和頸動脈橋血管研究

利用腺病毒載體將人基質(zhì)金屬蛋白酶-3基因?qū)胪妙i靜脈中，頸動-靜脈吻合模型中的靜脈管腔直徑和血流可明顯改善。在相似的動物模型中，采用環(huán)氧合酶1或人組織性纖維蛋白溶酶原基因轉(zhuǎn)染靜脈橋也取得了很好的療效。多名學者認為基因治療在橋血管狹窄防治中仍具有良好的研究意義和應(yīng)用前景。

（3）腺病毒載體在高血壓中的應(yīng)用研究

Miller等［15］在大鼠卒中易感型自發(fā)性高血壓動物模型中，頸動脈注入腺病毒介導(dǎo)一氧化氮合酶進行干預(yù)，因為這種體循環(huán)導(dǎo)入方式缺乏靶向性，并沒有達到有效地調(diào)節(jié)血壓升高的效果。作者改用生物特異性抗體結(jié)合于腺病毒受體和柯薩奇病毒，可靶向血管緊張素轉(zhuǎn)換酶，大大促進血管中內(nèi)皮細胞NO合成酶的表達達到調(diào)節(jié)血壓的效果。有學者采用腺病毒載體介導(dǎo)的內(nèi)皮細胞一氧化氮合酶和Rho蛋白激酶顯性負性突變體轉(zhuǎn)入調(diào)控血壓的關(guān)鍵部位--大鼠孤束核和前腹外側(cè)延腦，這種手段可有效地觀察一氧化氮和Rho蛋白激酶的生理作用［16］。

（4）腺病毒載體在其它心血管病中的研究

在心臟放射照射模型中，核苷三磷酸焦磷酸酶是調(diào)節(jié)血管二磷酸腺苷（血小板富集血栓形成的關(guān)鍵因素）代謝的重要因子，采用表達人核苷三磷酸焦磷酸酶同工異構(gòu)體I和II的腺病毒載體感染平滑肌細胞后，發(fā)現(xiàn)同工異構(gòu)體I可顯著地發(fā)揮抗血小板聚集的效果，而同工異構(gòu)體II卻無此功效；進一步將表達同工異構(gòu)體I的腺病毒載體經(jīng)頸動脈注入，在大鼠照射模型中發(fā)現(xiàn)血栓形成和繼發(fā)的內(nèi)膜增生均被抑制，說明在損傷血管中局部表達核苷三磷酸焦磷酸酶，可能預(yù)防動脈血栓形成和繼發(fā)的內(nèi)膜增生［17］。

在主動脈縮窄模型的研究中，Shimano在脂聯(lián)素基因敲除大鼠主動脈縮窄模型中，給予腺病毒載體介導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞生長因子，可逆轉(zhuǎn)微血管的形成，并可改善心臟功能［18］。在主動脈束縛的大鼠左室心肌肥大模型中，使用編碼細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑p16INK4a的腺病毒載體用心導(dǎo)管輸入，2 w后可明顯抑制心肌肥大，這表明G1細胞周期調(diào)節(jié)因子可能限制心肌肥大，這可能是心肌肥大的基因治療方式［19］。

Ivanciu等［20］將腺病毒介導(dǎo)的組織因子途徑抑制物2感染大鼠模型，發(fā)現(xiàn)新生血管減少，細胞外基質(zhì)沉積，這說明組織因子途徑抑制物是血管異常增生的重要凋節(jié)因子，它與心血管疾病、慢性炎癥甚至腫瘤、糖尿病密切相關(guān)。將輔助病毒依賴型腺病毒載體和第一代φE1載體注射入大鼠心肌內(nèi)，用ELISA法測定不同時相點GFP的表達，測定細胞因子表達，并觀察單核細胞、巨噬細胞和CD4+、CD8+淋巴細胞等炎性細胞浸潤情況，發(fā)現(xiàn)輔助病毒依賴型腺病毒載體載體優(yōu)于第一代腺病毒載體，可應(yīng)用于心血管病基因治療中［21］。

（5）腺病毒載體感染率和導(dǎo)入方式的研究

針對腺病毒載體感染率和導(dǎo)入方式的研究中主要有五種方式：心肌直接注射（開胸時采用）、冠狀動脈（冠脈搭橋術(shù)或建立心肌梗塞模型時采用）、頸動脈注射（心導(dǎo)管引導(dǎo)下或體外分離后應(yīng)用）、體循環(huán)靜脈注射（門靜脈或尾靜脈）、后腿肌肉注射。給心肌直接注射腺病毒載體有很高的感染率，腺病毒感染β半乳糖苷基因酶于心肌細胞后發(fā)現(xiàn)該基因的表達占心肌細胞的10%~32%，而以前的轉(zhuǎn)基因方法該基因在心臟的表達不足1%。Christopher等直接注射腺病毒載體于大動物模型心肌，2 d后轉(zhuǎn)基因表達達高峰并可持續(xù)14 d，表達面積更廣；注射后7 d，遠處器官的轉(zhuǎn)基因表達僅占心肌的0.1%，且對心臟功能、動物存活無明顯影響。但這種方法常需要開胸手術(shù)和呼吸機支持。將Ad-VEGF121直接注入豬心肌缺血模型心肌，基因表達是一過性的，且集中在心肌缺血區(qū)，局部表達的VEGF比經(jīng)冠脈給藥的濃度大10倍，而且使局部心肌血流改善。

5 腺病毒載體主要的問題和改進方法

腺病毒載體作為基因治療重要手段，它能夠感染終末分化細胞，不整合入宿主，避免了插入突變的可能，也具備感染效率高、體外穩(wěn)定、易于純化的優(yōu)點，但它仍有一些缺陷限制了它的使用。主要為：

（1）安全性問題

在用基因治療糾正疾病缺陷時，其安全性研究及評價也就成為人類普遍關(guān)注且迫切需要解決的問題。通過病毒將外源基因攜帶入人體，會不會干擾人體正常的基因活動？會不會在人體發(fā)揮應(yīng)有的正常作用？作為載體的病毒會不會重組出新的高傳染性疾?。ㄈ缒X炎）或發(fā)生腫瘤？導(dǎo)入或去除遺傳成分，是否會危及人類的生存？

（2）免疫反應(yīng)問題

腺病毒載體可與細胞基因的重組，使腺病毒結(jié)構(gòu)蛋白表達，引起機體免疫反應(yīng)。天生的和后天形成的針對腺病毒載體的免疫反應(yīng)仍是這項技術(shù)應(yīng)用的嚴重障礙，因為免疫反應(yīng)不僅可使外源基因表達時間縮短，而且可能導(dǎo)致嚴重的副作用［22］。第三代腺病毒載體也能引起一定程度的免疫反應(yīng)，但第三代腺病毒載體引起的免疫反應(yīng)要較第一代腺病毒載體引起的免疫反應(yīng)弱［23］。產(chǎn)生免疫反應(yīng)的機制主要和TCD4+、CTLS介導(dǎo)的免疫有關(guān)，B淋巴細胞也可能參與。免疫反應(yīng)早期先有炎癥介質(zhì)（CXC、CC、MCP、IP10等）聚集，然后吸引中性粒細胞、CD11b+細胞參與介導(dǎo)免疫反應(yīng)。

目前的主要對策為：①小劑量免疫抑制劑（環(huán)磷酰胺、FK506）、CTLA4Ig、抗CD40抗體等都能延長基因表達的時間；②誘導(dǎo)免疫耐受：在新生小鼠的胸腺內(nèi)注射腺病毒或腺病毒蛋白質(zhì)外殼或受腺病毒感染的肝細胞，使T細胞對其不能發(fā)生免疫應(yīng)答。③對腺病毒載體進行修飾、改進以消除或減少免疫反應(yīng)；④采用芯片技術(shù)、轉(zhuǎn)基因細胞株或基因敲除鼠和新一代的腺病毒載體，以期深入探討細胞內(nèi)的免疫防御機制［24］。

（3）感染效率問題

目前仍在不斷探索進一步提高腺病毒載體感染效率的方法。Sharif F等［25］比較腺病毒和腺病毒相關(guān)兩種載體在心血管疾病中作用的異同時，在頸動脈腔內(nèi)注射入載體，發(fā)現(xiàn)腺病毒載體全部在內(nèi)皮細胞中表達，而腺病毒相關(guān)載體主要在平滑肌細胞中表達，說明它們適用于不同的心血管疾病基因治療中。目前對腺病毒載體衣殼蛋白質(zhì)的遺傳修飾是提高其對宿主細胞感染效率的主要途徑［26］。有學者對人巨細胞病毒啟動子/增強子進行改良，大大增強了腺病毒載體在平滑肌細胞中的基因轉(zhuǎn)移效果［27］。整合素α3β1在成熟心肌細胞中表達下調(diào)，導(dǎo)致細胞內(nèi)吞腺病毒的能力下降，這可能是腺病毒載體針對這類成熟細胞感染率低下的關(guān)鍵原因［28］。

（4）基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的靶向性和給藥途徑

準確地將腺病毒載體導(dǎo)向靶部位，提高局部治療因子濃度，延長局部滯留時間，減少進入全身循環(huán)的量，給藥方式的選擇也是很重要的?；颊邔ρ軆?nèi)注射的重組腺病毒載體具有良好的接受能力，但在7.5×1013個粒子時可出現(xiàn)心功能受抑情況。為了解腺病毒載體對心臟的具體作用，研究者將不同劑量的載體經(jīng)體循環(huán)血管腔內(nèi)注射后，并監(jiān)測心電圖，發(fā)現(xiàn)載體與特定細胞如枯否氏細胞的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)相互作用，從而影響心電信號傳導(dǎo)［29］。

盡管給藥方式多樣，但臨床治療中最大的障礙是細胞毒性和腺病毒扣押在非靶向組織，參與的因素和機制仍不明了。靜脈注射的病毒顆粒絕大多數(shù)扣押在肝臟并繼發(fā)炎性反應(yīng)。凝血因子IX和C4補體復(fù)合物結(jié)合蛋白可結(jié)合于腺病毒纖維頂端球域，提供病毒被內(nèi)吞的橋梁。一種名為Ad5mut的新穎載體，它含有突變纖維頂端球域，在體內(nèi)實驗中表現(xiàn)出肝細胞感染率和肝毒性下降，這可能成為體循環(huán)應(yīng)用腺病毒載體的新穎手段［30］。

（5）大規(guī)模生產(chǎn)和純化問題

目前為盡量減少輔助基因組自身的包裝效率、分離第三代腺病毒與輔助病毒，優(yōu)化方法主要有Cre-loxP重組系統(tǒng)、FLP-frt重組系統(tǒng)、φC31-attB/attP重組系統(tǒng)、容量限制型蛋白IX-缺失輔助細胞、非腺病毒載體作輔助病毒、Av1S4BflxFE3輔助病毒。這些方法可有效減少輔助病毒的重排，從而增加第三代病毒載體的產(chǎn)量。

6 展望

心血管疾病是影響人類生命健康的頭號疾病，腺病毒載體以其獨特的優(yōu)越性而在心血管疾病的基因治療中被廣泛應(yīng)用，新的載體系統(tǒng)不斷完善和發(fā)展，相關(guān)基因試驗報道和治療研究層出不窮，目前已進入三期臨床實驗。針對惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的腺病毒載體定位碼基因注射劑（Cerepro）已在法國批準并上市，展現(xiàn)了腺病毒載體的極大應(yīng)用前景。但它從實驗研究走向成熟穩(wěn)定的臨床應(yīng)用，還需要在腺病毒的分子生物學、載體優(yōu)化設(shè)計、安全性評估等方面展開深入的廣泛的研究，從而真正發(fā)揮其在基因轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因治療上的優(yōu)勢和潛力，最終為心血管疾病的基因治療服務(wù)。

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