八角茴香化學(xué)成分的研究

袁經(jīng)權(quán)， 周小雷， 王 碩， 繆劍華*， 柯昌強(qiáng)， 楊新洲

(1.廣西藥用植物研究所，廣西南寧530023;2.暨南大學(xué)中藥及天然藥物研究所，廣東廣州510632;3.中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所，上海201203)

八角茴香又稱八角，為木蘭科八角屬植物(Illicium verum Hook.f.)干燥成熟果實(shí)，主要分布于廣西、云南、廣東等地。八角主產(chǎn)我國(guó)，既是香料和居家調(diào)料，也是我國(guó)常用中藥材，為藥典收載品種，其味辛、性溫，有溫陽散寒、理氣止痛功效，用于寒疝腹痛、腎虛腰痛等癥［1］。近年來八角作為重要醫(yī)藥原料倍受關(guān)注，它既是瑞士羅氏藥業(yè)有限公司抗流感藥物達(dá)菲合成前體莽草酸的主要原料，也是我國(guó)金嗓子喉寶、鎖陽固精丸、茴香橘核丸、十香暖臍膏等著名中成藥的配伍藥材。前人對(duì)八角茴香化學(xué)成分有一定研究，但有欠深入和系統(tǒng)。事實(shí)上，八角中的有機(jī)酸、多糖、總萜、總黃酮極具開發(fā)價(jià)值，系統(tǒng)研究其化學(xué)成分，對(duì)充分闡明其物質(zhì)基礎(chǔ)，開發(fā)其有效組分甚至有效成分，制定專屬性強(qiáng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有十分重要的意義。我們?cè)谇捌谘芯堪私菗]發(fā)油和脂肪酸［1］基礎(chǔ)上，現(xiàn)對(duì)八角進(jìn)行了初步化學(xué)成分研究，從中分離鑒定了10個(gè)化學(xué)成分，其中7個(gè)為黃酮苷系列(見圖1)。它們分別是1α-羥基-3-去氧偽莽草毒素(1)，蘇-茴香腦乙二醇(2)，異槲皮苷(3)，槲皮素-3′-O-甲基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)，槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷(5)，槲皮素-3-O-D-木糖苷(6)，檉柳素3-O-橙皮糖苷(7)，4-甲氧基蘆丁(8)，異鼠李素-3-O-蕓香糖苷(9)，莽草酸(10)。除了莽草酸外，所有化合物均未見從八角中分離得到的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。

圖1 黃酮苷類化合物3～9的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structure of flavonoid glycosides 3～9

1 儀器和材料

756MC UV-VIS分光光度計(jì)，Nicolet Magna-FTIR-750紅外光譜儀，Autospec-UltimaETOF質(zhì)譜儀，INOVA-500核磁共振儀。柱色譜硅膠(100～200目和200～300目)，薄層色譜用硅膠H、硅膠G、GF254和制備薄層硅膠GF254均為青島海洋化工廠生產(chǎn)，Sephadex LH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品，所用試劑均為分析純。

藥材于2006年10月和2007年5月采自廣西上林縣，經(jīng)廣西藥用植物研究所余麗瑩副研究員鑒定為Illicium verum Hook.f.秋果和春果的干燥成熟果實(shí)，標(biāo)本現(xiàn)保存于廣西藥用植物研究所中藥制劑研究室標(biāo)本柜。

2 提取分離

陰干干燥的八角茴香3 kg(秋果2.5 kg，春果0.5 kg)，粉碎，過10目篩，分別用15倍量95%乙醇冷浸提取3次，每次5 d，合并提取液，減壓回收乙醇得浸膏0.42 kg。浸膏加適量蒸餾水分散，依次用石油醚、氯仿及正丁醇萃取。氯仿萃取物以石油醚-乙酸乙酯-甲醇(95%∶5%∶0%→60%∶35%∶5%)進(jìn)行梯度洗脫，得到12個(gè)部位，各分離部位再經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析及Sephadex LH-20純化，最后分離得到化合物1(17 mg)，化合物2(23 mg);正丁醇萃取物以氯仿-甲醇(80%∶20%→30%∶70%)進(jìn)行梯度洗脫，得到10個(gè)部位，各部位再經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析及Sephadex LH-20純化，得到化合物3(15 mg)，化合物4(27 mg)，化合物5(49 mg)，化合物6(36 mg)，化合物7(11 mg)，化合物8(19 mg)，化合物9(21 mg)，化合物10(453 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末，EI-MS m/z:274［M+］。1H NMR(CD3OD)δ 2.25(1H，m，H-2)，2.40(1H，m，H-2)，1.92(1H，m，H-3)，2.28(1H，m，H-3)，2.26(1H，d，J=16.3 Hz，H-8)，2.76(1H，dd，J=16.3，2.1 Hz，H-8)，2.58(1H，d，J=15.0 Hz，H-10)，3.38(1H，dd，J=16.3 Hz，2.1 Hz，H-10)，1.31(1H，s，H-12)，1.14(1H，s，H-13)，3.93(1H，d，J=14.2 Hz，H-14)，4.47(1H，d，J=14.2 Hz，H-14)，1.25(1H，s，H-15)。經(jīng)與文獻(xiàn)［2］對(duì)比一致，故鑒定為1α-羥基-3-去氧偽莽草毒素(1α-hydroxy-3-deoxypseudoanisatin)。

化合物2 無色粉末，EI-MS m/z:182［M+］。1H NMR(CD3OD)δ 4.28(1H，d，J=7.3 Hz，H-1)，3.77(1H，dq，J=7.3，6.2 Hz，H-2)，0.93(3H，d，J=6.2 Hz，Me-3)，7.26(2H，d，J=6.6 Hz，H-2′，6′)，6.88(2H，d，J=6.6 Hz，H-3′，5′)，3.78(3H，s，MeO-4′)。經(jīng)與文獻(xiàn)［3］對(duì)比一致，故鑒定為蘇-茴香腦乙二醇(threo-anethole glycol)。

化合物3 淺黃色粉末，EI-MS m/z:464［M+］。1H NMR(CD3OD)δ 6.21(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.40(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.71(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.86(1H，d，8.5 Hz，H-5′)，7.58(1H，dd，J=8.5，1.8 Hz，H-6′)，5.24(1H，d，J=7.9 Hz，H-1″)，3.48(1H，m，H-2″)，3.43(1H，m，H-3″)，3.37(1H，m，H-4″)，3.23(1H，m，H-5″)，3.51，3.71(2H，m，H-6″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道的一致，故鑒定為quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside，即異槲皮苷(isoquercitrin)。

化合物4 淺黃色粉末，EI-MS m/z:478［M+］。1H NMR(CD3OD-d4)δ 6.20(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.39(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.96(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.92(1H，d，8.0 Hz，H-5′)，7.59(1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6′)，3.92(3H，s，3′-OMe)，5.40(1H，d，J=7.2 Hz，H-1″)，3.49(1H，m，H-2″)，3.45(1H，m，H-3″)，3.40(1H，m，H-4″)，3.26(1H，m，H-5″)，3.54，3.73(2H，m，H-6″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］報(bào)道的一致，故鑒定為槲皮素-3′-O-甲基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖 苷 (quercetin3′-O-methyl-3-O-β-D-glucopyranoside)。

化合物5 淺黃色粉末，LC-MS(ESI+)，m/z 891［2M+Na］，435［M+1］+。1H NMR(CD3OD)δ 6.20(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.40(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.57(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.85(1H，d，8.4 Hz，H-5′)，7.66(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6′)，5.27(1H，d，J=5.2 Hz，H-1″)，3.75(1H，m，H-2″)，3.51(1H，m，H-3″)，3.64(1H，m，H-4″)，3.59，3.21(2H，m，H-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］報(bào)道的一致，故鑒定為槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷(quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside)。

化合物6 淺黃色粉末，LC-MS(ESI+)，m/z 891［2M+Na］，435［M+1］+。1H NMR(CD3OD)δ 6.20(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.40(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.50(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，6.84(1H，d，8.2 Hz，H-5′)，7.54(1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-6′)，5.34(1H，d，J=7.3 Hz，H-1″)，3.30(1H，m，H-2″)，3.19(1H，m，H-3″)，3.32(1H，m，H-4″)，3.63，3.00(2H，m，H-5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道的一致，故鑒定為槲皮素-3-O-D-木糖苷(quercetin-3-O-D-xylopyranoside)。

化合物7 淺黃色粉末，EI-MS m/z 624［M+］。1H NMR(CD3OD)δ 6.22(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.48(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.98(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.86(1H，d，8.4 Hz，H-5′)，7.54(1H，dd，J=8.4，1.8 Hz，H-6′)，3.83(3H，s，4′-OMe)，5.80(1H，d，J=7.2 Hz，H-1″)，3.0 ～4.0(1H，m，H-2″)，3.0 ～ 4.0(1H，m，H-3″)，3.0～4.0(1H，m，H-4″)，3.0～4.0(1H，m，H-5″)，3.0 ～4.0(2H，m，H-6″)，5.06(1H，bs，H-1?)，3.0～4.0(1H，m，H-2?)，3.0 ～4.0(1H，m，H-3?)，3.0～4.0(1H，m，H-4?)，3.0～4.0(1H，m，H-5?)，0.68(3H，d，J=6.2 Hz，H-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報(bào)道的一致，故鑒定為檉柳素3-O-橙皮糖苷(tamarixetin 3-O-neohesperidoside)。

化合物8 淺黃色粉末，EI-MS m/z 624［M+］。1H NMR(DMSO-d6)δ 6.18(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.40(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.95(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.85(1H，d，8.2 Hz，H-5′)，7.55(1H，dd，J=8.2，1.8 Hz，H-6′)，3.88(3H，s，4′-OMe)，5.75(1H，d，J=7.4 Hz，H-1″)，3.0～4.0(1H，m，H-2″)，3.0～4.0(1H，m，H-3″)，3.0 ～4.0(1H，m，H-4″)，3.0 ～4.0(1H，m，H-5″)，3.0 ～4.0(2H，m，H-6″)，5.08(1H，bs，H-1?)，3.0～4.0(1H，m，H-2?)，3.0～4.0(1H，m，H-3?)，3.0 ～4.0(1H，m，H-4?)，3.0～4.0(1H，m，H-5?)，0.76(3H，d，J=6.2 Hz，H-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報(bào)道的一致，故鑒定為4-甲氧基-蘆丁(4-Methoxy rutin)。

化合物9 淺黃色粉末，EI-MS m/z 624［M+］。1H NMR(DMSO-d6)δ 6.16(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)，6.38(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，7.91(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.79(1H，d，8.3 Hz，H-5′)，7.55(1H，dd，J=8.3，1.8 Hz，H-6′)，3.85(3H，s，4′-OMe)，5.23(1H，d，J=7.5 Hz，H-1″)，3.0～4.0(1H，m，H-2″)，3.0～4.0(1H，m，H-3″)，3.0 ～4.0(1H，m，H-4″)，3.0 ～4.0(1H，m，H-5″)，3.0 ～4.0(2H，m，H-6″)，4.50(1H，bs，H-1?)，3.0～4.0(1H，m，H-2?)，3.0～4.0(1H，m，H-3?)，3.0 ～4.0(1H，m，H-4?)，3.0～4.0(1H，m，H-5?)，1.10(3H，d，J=6.4 Hz，H-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道的一致，故鑒定為異鼠李素-3-O-蕓香糖苷(isorhamnetin-3-O-rutinoside)。

化合物10 白色粉末，IR(KBr)νmaxcm-1:3 481，2 943，2 881，1 681，1 647，1 454，1 388。UV(MeOH)λmaxnm:220.80，251.40。EI-MS m/z:174［M+］(0)，156(25)，138(45)，97(98)，60(100)。1H-NMR(D2O):6.85(1H，d，J=4Hz，H-2)，4.45(1H，dd，J=4，8.5 Hz，H-3)，4.03(1 H，dd，J=6.5，14 Hz，H-4)，3.77(1H，ddd，J=5.0，8.5 Hz，H-5)，2.22(1H，dd，J=6.5，18.5 Hz，H-6)，2.74(1H，dd，J=5.0，18.5 Hz，H-6)。13CNMR(D2O)δ:139.2(C-1)，133.6(C-2)，74.2(C-3)，69.6(C-4)，68.8(C-5)，33.6(C-6)，173.8(C=O)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報(bào)道的一致，故鑒定為莽草酸(shikimic acid)。

［1］袁經(jīng)權(quán)，馮 潔，繆劍華，等.GC-MS分析八角茴香種子CO2超臨界流體萃取物中的脂肪酸成分［J］.中國(guó)中藥雜志，2007，32(8):742-743.

［2］Huang Jianmei，Yang Chunshu，Tanaka M，et al.Structures of merrilactones B and C，novel anislactone-type sesquiterpenes from Illicium merrillianum，and chemical conversion of anislactone B to merrilactone A［J］.Tetrahedron，2001，57:4691-4698.

［3］Masateru O，Yasuyuki I，Thoru I，et al.Five new monoterpene glycosides and other compounds from Foeniculi fructus［J］.Chem Pharm Bull，1996，44(2):337-342.

［4］Zhang Huili，Nagatsu A，Okuyama H，et al.Sesquiterpene glycosides from cotton oil cake［J］.Phytochemistry，1998，48(4):665-668.

［5］Stark T，Bareuther S，Hofmann T.Sensory-Guided decomposition of roasted cocoa nibs and structure determination of taste-active polyphenols［J］.J Agric Food Chem，2005，53(13):5407-5418.

［6］Olszewska M，Wolbis M.Further flavonoids from the leaves of prunus spinosa L［J］.Acta Pol Pharm，2002，59(2):133-138.

［7］Bernadete P D S，Robson R B，Jose P P.Flavonol glycosides from Costus spicatus［J］.Phytochemistry，2000，53:87-92.

［8］Chemistry of Natural Compounds［M］∥ Khimiya Prirodnykh Soedinenii，1970:368-371.

［9］Markham K R，Hammet K R W.The basis of yellow colouration in Lathyrus aphaca flowers［J］.Phytochemistry，1994，37(1):163-165.

［10］畢躍峰，鄭曉珂，劉宏民，等.馬尾松松針化學(xué)成分的研究［J］. 藥學(xué)學(xué)報(bào)，2001，36(11):832-835.