海帶多糖排鉛作用研究*

王園園 于 一 倪倍倍 王蜀平 石振艷 岳旺

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，山東 青島 266021)

鉛污染威脅人類健康，其源于含鉛食品、油漆類物品、含鉛化妝品、染發(fā)劑、汽車尾氣等。鉛類化合物是一種很難降解，沉積于機體，可對骨髓造血系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等產(chǎn)生毒害作用[1-2]?，F(xiàn)臨床藥物依地酸鈉鈣、二巰基丁二酸鈉等絡(luò)合劑可治療鉛中毒，其排鉛效果雖好，但有過敏等毒副作用。因此，尋找一種天然、低毒的排鉛藥物已備受關(guān)注[3]。

海帶多糖是從海藻中提取的水溶性酸性多糖。已有報道稱海帶多糖可提供氨基、醛基以及硫酸根等，與金屬離子有較強的螯合作用[4-5]。本研究建立大鼠鉛中毒模型，采用原子吸收分光光度法、比色法等方法，研究海帶多糖的排鉛作用。

1 材料與方法

1.1 動 物

Wistar大鼠，雌雄各半，160-180 g，由河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供(動物合格證號：SCXK(鄂)2004-0007)

1.2 儀 器

分光光度計(723N);原子吸收分光光度計(日本日立Z-7000型)、電子天平、顯微鏡、酶標(biāo)儀(MD29SpectraMax 190)

1.3 藥品與試劑

海帶多糖，購自青島明月海藻集團有限公司(批號：080318)；青霉胺片，上海信誼萬象藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)(批號：080102)；肝素鈉注射液，天津市生物化學(xué)制藥廠生產(chǎn)(批號：20070601)；醋酸鉛等均為國產(chǎn)分析純。標(biāo)志酶測定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 實驗方法

1.4.1實驗動物分組方案

大鼠按體重隨機分為6組，每組8只，雌雄各半，隨機分正常對照組(正常飲食30 d)、模型組(自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30 d)、陽性對照組(自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30 d +按90 mg·kg-1體重ip青霉胺21 d)、海帶多糖低、中、高劑量組(自由飲用0.3%醋酸鉛水溶液30d +50 mg·kg-1、100 mg·kg-1、200 mg·kg-1ig海帶多糖)。

1.4.2血鉛及血清中有關(guān)酶的測定

實驗一個月后，各組動物麻醉，從腹主動脈取血。取全血，采用高鐵血紅蛋白還原法，測定G-6-PD活力，并在推片煌焦油藍染色光鏡下計數(shù)1000個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞 (Retic)數(shù)；取血清，采用原子吸收分光光度計測定血鉛，采用分光光度法、比色法測定血清中LDH、ACP、β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)等相關(guān)酶活性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，用spss13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理。

2 結(jié) 果

2.1 海帶多糖對大鼠血鉛的影響

與空白對照組比較，各組血鉛均升高，尤其是模型對照組，說明鉛中毒模型造模成功(P<0.05)；與模型對照組比較，陽性藥物組和海帶多糖高劑量組緩解血鉛升高水平(P<0.05),說明海帶多糖能夠降低鉛中毒大鼠體內(nèi)的血鉛含量，并呈現(xiàn)量效關(guān)系。

表1 海帶多糖對大鼠血鉛的影響

注：與空白對照組比較，aP<0.05；與模型對照組比較，bP<0.05

2.2 海帶多糖對大鼠血中網(wǎng)織紅細胞的影響

與空白對照組比較，模型對照組網(wǎng)織紅細胞數(shù)目升高，說明鉛中毒模型造模成功(P<0.05)；與模型對照組比較，海帶多糖高、中劑量組降低網(wǎng)織紅細胞數(shù)目(P<0.05),說明海帶多糖能夠降低鉛中毒大鼠體內(nèi)的網(wǎng)織紅細胞數(shù)目，并呈現(xiàn)量效關(guān)系。

表2 海帶多糖對大鼠血中網(wǎng)織紅細胞百分比的影響

注：與空白對照組比較，aP<0.05；與模型對照組比較，bP<0.05

2.3 海帶多糖對大鼠血清中標(biāo)志酶活性的影響

LDH：與空白對照組比較，模型對照組與海帶多糖中、低劑量組LDH活性降低(P<0.05)；與模型對照組比較，陽性藥物組和海帶多糖高劑量組能糾正鉛中毒引起的LDH活性降低(P<0.05)。

G-6-PD:與空白對照組比較，模型對照組與海帶多糖高、低劑量組G-6-PD活性降低(P<0.05)；與模型對照組比較，陽性藥物組和海帶多糖高、中劑量組能使G-6-PD活性升高(P<0.05)。

ACP：與空白對照組比較，模型對照組、陽性藥物組和海帶多糖低劑量組ACP活性均降低(P<0.05)；與模型對照組比較，海帶多糖高劑量組能改善ACP活性(P<0.05)，而且優(yōu)于陽性藥物組。

β-GD：各用藥組與空白對照組和模型對照組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義，說明鉛中毒對β-GD活性影響不大(P>0.05)。

表3 海帶多糖對大鼠血清中標(biāo)志酶活性的影響

注：與空白對照組比較，aP<0.05；與模型對照組比較，bP<0.05

3 討 論

本實驗參照文獻成功制備了鉛中毒模型[6]。各組與模型對照組比較，陽性藥物組和海帶多糖高劑量組顯示有統(tǒng)計學(xué)意義,說明海帶多糖能降低鉛中毒大鼠體內(nèi)的血鉛含量，并呈現(xiàn)量效關(guān)系。

網(wǎng)織紅細胞屬于幼稚紅細胞，易被鉛損害，鉛中毒48小時后，血液中的網(wǎng)織紅細胞數(shù)目升高；鉛還可造成血紅蛋白合成障礙，隨著血鉛濃度的升高，網(wǎng)織紅細胞蛋白含量逐漸降低，而網(wǎng)織紅細胞數(shù)目逐漸升高，單個網(wǎng)織紅細胞的平均血紅蛋白含量明顯降低。本結(jié)果表明海帶多糖能降低鉛中毒大鼠體內(nèi)網(wǎng)織紅細胞數(shù)目。

LDH 、G-6-PD、 ACP、β-GD存在于血清中，與機體有著密切的關(guān)系，一旦受到影響，將會導(dǎo)致多種疾病的產(chǎn)生，鉛中毒后會使LDH 、G-6-PD、 ACP活性降低。本結(jié)果表明海帶多糖能改善鉛中毒后LDH活性降低情況，升高G-6-PD和ACP活性，而經(jīng)方差分析對β-GD活性影響不大。

本實驗結(jié)果表明海帶多糖對鉛中毒大鼠有排鉛作用，為開發(fā)海帶多糖成為天然低毒的排鉛藥物提供進一步依據(jù)。

[1] Rokho K,Hu H,Rotnitzky A,et al.A longitudinal study of chronic lead exposure and physical growth in Boston children[J].EHP,1995,103:952-971.

[2] 張銑，劉毓谷.毒理學(xué)[M].北京:北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997.348-359.

[3] 張香莉，劉亞杰，楊雪萍等. 太安對大鼠血常規(guī)和肝功能的影響[J].中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2003,16(1):35-36.

[4] 周杰，陳安國.海藻多糖生物研究進展[J].飼料工業(yè)，2005，26(18)：12-15.

[5] 朱明.海藻糖的功能及其應(yīng)用[J].食品工程，2003，(5):15.

[6] 牛延獻，哈小琴. 不同程度鉛中毒模型的制備[J].西北國際醫(yī)學(xué)雜志，2009，30(1)：32-33.