CD31在神經(jīng)鞘瘤中的表達(dá)及鑒別診斷意義

王行富，張 聲，陳余朋，陳鷺姍

福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科(福建 福州 350005)

神經(jīng)鞘瘤是周圍神經(jīng)鞘膜腫瘤中最常見的一類腫瘤，大部分發(fā)生在中樞神經(jīng)以外的部位，如皮下或腹膜后等。對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)而言，神經(jīng)鞘瘤最好發(fā)于橋小腦角，尤其是第8對(duì)顱神經(jīng)中樞部分和周圍髓鞘移行處，少部分發(fā)生于脊髓，極少數(shù)位于顱內(nèi)實(shí)質(zhì)或腦室內(nèi)。通常情況下，神經(jīng)鞘瘤具有較為特征性的Antoni A和Antoni B分區(qū)，?？尚纬蒝arocay小體，診斷并不困難。但在部分病例中Antoni分區(qū)不明顯，腫瘤由彌漫的梭形細(xì)胞組成時(shí)，常易與發(fā)生于該處的纖維型或過渡型腦膜瘤混淆。CD31是分子量為130KD的跨膜糖蛋白,尤其在血管內(nèi)皮細(xì)胞的連接處有高水平表達(dá)，較少表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞及白細(xì)胞以外的細(xì)胞。本研究采用免疫組化的方法檢測(cè)發(fā)生在中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)鞘瘤CD31表達(dá)情況以及在與腦膜瘤鑒別中的意義。

1 材料與方法

1.1材料選取2008-2009年福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院部分神經(jīng)外科手術(shù)后石蠟包埋福爾馬林固定標(biāo)本。神經(jīng)鞘瘤46例，其中36例發(fā)生在橋小腦角，10例發(fā)生在脊髓；Antoni-A和Antoni B分區(qū)明顯者20例，無明顯分區(qū)或AntoniB區(qū)為主26例；年齡27～54歲，平均年齡(36.4±3.7)歲；男27例，女19例。腦膜瘤28例，其中發(fā)生在橋小腦角14例，發(fā)生在脊髓的14例；纖維或纖維母細(xì)胞型腦膜瘤13例，過渡型腦膜瘤10例，腦膜上皮細(xì)胞型腦膜瘤5例；年齡25～67歲，平均年齡(39.1±5.2)歲；男16例，女12例。

1.2方法鼠抗人CD31蛋白單克隆抗體(JC70A，M082329，Dako；1∶100)、CD34單克隆抗體 (QBEnd10，M716529，Dako；1∶100)及EnVisiontm試劑盒(K5007,Dako)，購(gòu)自DAKO公司,FVIII單克隆抗體(F8/86，Neumaker；1∶100)購(gòu)自Neumaker公司。采用EnVision兩步法。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，微波修復(fù)抗原，3%H2O2溶液室溫孵育20 min消化內(nèi)源性過氧化物酶，10%正常羊血清封閉30 min，分別加一抗CD31、CD34、FVIII，濕盒中孵育2 h，滴加二抗，Envision試劑室溫孵育1 h。各步驟間均以0.01 mol/L PBS緩沖溶液沖洗2 min連續(xù)3次。DAB顯色5 min，蘇木素復(fù)染，脫水透明，中性樹膠封片。用PBS緩沖溶液代替一抗，作為陰性對(duì)照。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有顯著。

2 結(jié)果

神經(jīng)鞘瘤中45.7%(21/46)表達(dá)CD31(表1)，于腫瘤細(xì)胞胞漿顆粒狀著色，表達(dá)范圍主要位于Antoni B區(qū)(圖1-A-C)，在分區(qū)不明顯的腫瘤組織中表達(dá)較為彌漫，主要表達(dá)模式為核旁點(diǎn)狀陽(yáng)性。相應(yīng)組織CD34(圖1-D)和FVIII(圖1-E)染色微小血管陽(yáng)性，腫瘤細(xì)胞陰性。28例腦膜瘤中僅1例(3.6%)纖維型腦膜瘤局灶表達(dá)CD31。神經(jīng)鞘瘤與腦膜瘤CD31的表達(dá)具有顯著差異性(χ2=14.74，P<0.001)，無明顯Antoni分區(qū)的神經(jīng)鞘瘤與纖維型或過渡型腦膜瘤CD31的表達(dá)同樣具有顯著的差異性(χ2=14.08，P<0.001)。

表1 CD31在神經(jīng)鞘瘤和腦膜瘤中的表達(dá)

a神經(jīng)鞘瘤與腦膜瘤CD31的表達(dá)比較，χ2=14.74，P<0.001

b無明顯分區(qū)的神經(jīng)鞘瘤與纖維或過渡型腦膜瘤CD31表達(dá)比較，χ2=14.08，P<0.001

圖1 CD31在神經(jīng)鞘瘤中的表達(dá) (A)神經(jīng)鞘瘤HE染色(100×)，(B)CD31在神經(jīng)鞘瘤中彌漫表達(dá)(100×)，(C)為B的高倍，CD31主要顯示呈核旁點(diǎn)狀陽(yáng)性(400×)，(D)CD34和(E)FVIII顯示腫瘤中的微小血管(100×)。

3 討論

CD31又名PECAM-1，屬于免疫球蛋白超家族成員[1]。CD31主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、單核細(xì)胞、中心粒細(xì)胞、幼稚的CD8+的T細(xì)胞及NK細(xì)胞表面[2]，此外，在骨髓干細(xì)胞和骨髓轉(zhuǎn)化細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞、破骨細(xì)胞等也有表達(dá)。最近有研究發(fā)現(xiàn)CD31也可在人腦、睪丸和卵巢等組織表達(dá)[3]。

CD31在人體實(shí)體腫瘤中主要表達(dá)于一些脈管及相關(guān)來源的腫瘤，包括上皮樣的血管內(nèi)皮瘤、上皮樣肉瘤等，還包括組織細(xì)胞惡性腫瘤、漿細(xì)胞瘤等，在其他的實(shí)體腫瘤中表達(dá)罕有報(bào)道。1993年Tang等[4]發(fā)現(xiàn)CD31在部分實(shí)體腫瘤細(xì)胞系表達(dá)，并通過DNA測(cè)序證實(shí)腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞CD31屬同一序列。1999年Aroca等[5]發(fā)現(xiàn)部分膠質(zhì)腫瘤細(xì)胞胞漿及胞膜表達(dá)CD31，最近Khattab等[6]也證實(shí)了這個(gè)結(jié)果。他們認(rèn)為CD31分子可能參與腫瘤細(xì)胞粘附于內(nèi)皮細(xì)胞和促進(jìn)腫瘤血管生成的過程。本研究發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)鞘瘤中也可部分表達(dá)CD31，尤其是在腫瘤細(xì)胞疏松的區(qū)域或者Antoni B區(qū)。

一般情況下，局灶區(qū)域的染色，常可能被認(rèn)為是非特異性著色。為了消除非特異性著色，首先所有切片均用3%過氧化氫溶液處理，去除內(nèi)源性過氧化氫酶。同時(shí)運(yùn)用上皮樣血管內(nèi)皮瘤作為陽(yáng)性對(duì)照，子宮頸鱗狀細(xì)胞癌作為陰性對(duì)照，再加上CD34和FVIII染色顯示小血管，排除將微小血管染色誤判為神經(jīng)鞘瘤腫瘤細(xì)胞的著色。在上述條件處理下，仍然有片狀甚至彌漫的陽(yáng)性染色出現(xiàn)，我們認(rèn)為是可靠的染色。

本研究中我們發(fā)現(xiàn)45.7%(21/46)的神經(jīng)鞘瘤出現(xiàn)CD31的染色，進(jìn)一步證實(shí)了CD31在非脈管細(xì)胞及其相應(yīng)腫瘤以外的表達(dá)。表達(dá)主要在細(xì)胞疏松區(qū)域，呈片狀或局灶著色模式，大部分呈現(xiàn)核旁點(diǎn)狀染色模式。雖其敏感性不是很高，但在神經(jīng)鞘瘤的診斷中結(jié)合其他常見的抗體如S-100、Leu-7等，在診斷中具有一定的作用。CD31在神經(jīng)鞘瘤中的出現(xiàn)表達(dá)機(jī)制尚不清楚。CD31作為血管內(nèi)皮細(xì)胞主要的粘附分子，參與腫瘤細(xì)胞與血管內(nèi)皮之間的粘附過程。神經(jīng)鞘瘤部分病例可以出現(xiàn)血管瘤樣的改變，此現(xiàn)象常出現(xiàn)在細(xì)胞疏松區(qū)域，CD31主要表達(dá)于疏松區(qū)域，推測(cè)神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞可能具有產(chǎn)生CD31并促使血管生成或血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化的潛能。迄今為止文獻(xiàn)報(bào)道大約有10例血管肉瘤起源于神經(jīng)鞘瘤[7]，其發(fā)生是起源于腫瘤內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞還是神經(jīng)鞘瘤瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)化尚不得而知。

神經(jīng)鞘瘤在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生在橋小腦角以及脊髓。橋小腦角腫瘤神經(jīng)鞘瘤約占所有的75%，腦膜瘤大約占10%～15%。在脊髓處則腦膜瘤發(fā)生率較神經(jīng)鞘瘤高。通常情況下，神經(jīng)鞘瘤形成典型的兩種基本模式，一是致密的梭形腫瘤細(xì)胞形成柵欄狀核排列即Antoni A，而另外是一些細(xì)胞較小的，核呈圓形或卵圓形的細(xì)胞疏松區(qū)即Antoni B8。而發(fā)生在橋小腦角尤其是第VIII對(duì)顱神經(jīng)的神經(jīng)鞘瘤很少出現(xiàn)典型Antoni A結(jié)構(gòu)，常主要以Antoni B為主要特征，偶爾在NF2時(shí)還可見局灶腦膜上皮細(xì)胞島[9]。因此，腦膜瘤是發(fā)生在橋小腦角的神經(jīng)鞘瘤最主要的鑒別診斷之一。本研究發(fā)現(xiàn)CD31在45.7%(21/46)的神經(jīng)鞘瘤中出現(xiàn)表達(dá)，而在腦膜瘤中僅3.6%(1/28)出現(xiàn)局灶表達(dá)。在較易混淆的無Antoni分區(qū)的神經(jīng)鞘瘤和纖維型或過渡型腦膜瘤之間，CD31表達(dá)具有顯著的差異。因此，CD31也可作為二者鑒別的重要標(biāo)記。

越來越多的研究發(fā)現(xiàn)CD31在部分的實(shí)體腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，但其表達(dá)的機(jī)制及其意義尚需進(jìn)一步研究。

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