畜禽清瘟敗毒散和泄痢康的體外抑菌研究

陳瑞利　郁有?！∏璨?/p>

摘要：用清瘟敗毒散和泄痢康，在對雞沙門氏菌，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的體外抑菌試驗(yàn)中，均有較強(qiáng)的抑菌現(xiàn)象。冷浸法提取的中藥只達(dá)到中敏，而煎煮法則可達(dá)高敏。

關(guān)鍵詞：畜禽清瘟敗毒散瀉痢康體外抑菌

0 引言

隨著畜禽業(yè)的發(fā)展，雞沙門氏菌病、大腸桿菌病和金黃色葡萄球菌病被人們所重視[1-3]。在傳統(tǒng)的抗菌藥物治療的過程中，由于長期單一使用某一類抗生素，使細(xì)菌產(chǎn)生不同程度的耐藥性。為了能有效的克服這些缺點(diǎn)，并能調(diào)節(jié)動物機(jī)體的代謝，提高畜禽的生產(chǎn)性能。在臨床應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，河南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸藥廠生產(chǎn)的中蘊(yùn)藥制劑“畜禽清瘟敗毒散”和“瀉痢康”，對畜禽傳染性腹瀉有顯著療效。為研究其作用機(jī)理，做了這兩種中藥制劑的體外抑菌試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)如下：

1 材料

1.1 菌株 雞白痢沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均分離自病雞，經(jīng)形態(tài)特征、培養(yǎng)特性及系統(tǒng)生化和抗原鑒定，并經(jīng)接種實(shí)驗(yàn)動物選出。證實(shí)為肯有該屬種特性和較好病原性的菌株。

1.2 中藥 畜禽清瘟敗毒散（以下簡稱清敗散）、瀉痢康均由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸藥廠生產(chǎn)。清敗散主要有空心蓮、川黃連、銀花炭、板蘭根、大青葉、淮山藥、桔梗、赤芍、梔子、知母、丹皮、川芎、生石膏等多味中藥材組成；瀉痢康主要有川蓮、空心蓮、白頭翁、赤芍、黃柏、葛根、黨參、蒼術(shù)、苡仁、山藥、扁豆、云芩、澤瀉、山楂、陳皮等多味中藥材組成。

1.3 抗生素 氯霉素、慶大霉素、鏈霉素

1.4 培養(yǎng)基 普通培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂27g，營養(yǎng)肉湯22g，蒸餾水100ml，混勻，煮沸，高壓滅菌），普通肉湯管（營養(yǎng)肉湯22g，蒸餾水1000ml，混勻，煮沸，高壓滅菌）

2 方法

2.1 中藥的提取 對清敗散和瀉痢康散劑同時采用兩種方法提取有效成份。

2.1.1 冷浸法 取清敗散及瀉痢康散各40g，分別投入燒杯中，加蒸餾水剛好浸過藥面，在10-15℃以下浸漬48h，然后用四層干凈的無菌沙布過濾，將濾液自然濃縮到40ml，使藥液濃度為1g/ml，各以5ml藥液稀釋配成濃度為0.5g/ml待用。

2.1.2 煎煮法 取清敗散及瀉痢康散劑各40g，分別置燒杯中，加蒸餾水200ml，浸泡6h，然后加熱煮沸，煎煮1.5h用四層干凈的無菌沙布過濾，濃縮藥液至40ml，使藥液的濃度為1g/ml，各取5ml，稀釋配成濃度為0.5g/ml的藥液待用。

2.2 藥敏紙片的制備 經(jīng)過上述兩種方法提取后共得到不同藥物不同濃度的8種藥液。先將新華I號濾紙用直徑為6mm的打孔器打成小圓片，121℃高壓蒸汽滅菌20min備用。然后將滅菌的紙片按每種藥液10片，分別浸入8種不同的藥液中，然后取出，放入滅菌的敞口小瓶中干燥、備用。

2.3 菌液的制備 將雞沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌分別接種于營養(yǎng)瓊脂干板上，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，讓其長出菌落，挑選典型的單個菌落1-2個，用接種環(huán)吊取，在肉湯管的管壁上打碎后溶入肉湯中，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)到肉湯較為混濁時，即成為試驗(yàn)所用的菌液。

2.4 體外抑菌試驗(yàn) 采用紙片法，用滅菌的接種環(huán)蘸取菌液，用表面劃折線接種法均勻地將細(xì)菌接種于培養(yǎng)基上，貼上不同的藥敏紙片。每種紙片分別編號標(biāo)記，同樣的培養(yǎng)皿做4個，置37℃恒溫培養(yǎng)箱中24h后取出，測定并記錄每種藥敏紙片的平均抑菌環(huán)直徑，作為藥物相應(yīng)濃度的抑菌環(huán)直徑。共做三組，并分別測定每組的抑菌環(huán)直徑。

3 結(jié)果

試驗(yàn)中各種藥物不同濃度的抑菌環(huán)直徑見表1-3。

4 討論與分析

4.1 體外抑菌試驗(yàn)表明，清敗散和瀉痢康對三種病原菌均有較強(qiáng)的抑菌作用。煎煮法所提取的中藥對三種病原菌均為高敏，而冷浸法只達(dá)到中敏的效果。

4.2 中藥與西藥的體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果相比，二者的抑菌作用相差較大，但在治療雞白痢、仔豬黃白痢等疾病的臨床實(shí)踐中，這兩種中藥制劑的效果都很好，經(jīng)分析其主要原因有以下兩個方面：

4.2.1 試驗(yàn)中所用的提取方法有一定的局限性，沒把中藥中有效成份完全提取出來，從而影響到試驗(yàn)的結(jié)果，煎煮法比冷浸法效果好，如果用蒸餾法或別的方法，效果可能會更好一些，這還有待進(jìn)一步通過試驗(yàn)驗(yàn)證。

4.2.2 中藥防治疾病的作用機(jī)理與抗生素不同?？股剡M(jìn)入機(jī)體后，直接與病菌作用，殺滅病菌；而中藥進(jìn)入機(jī)體后，從根本上調(diào)節(jié)機(jī)體細(xì)胞的代謝，提高細(xì)胞的活力，使機(jī)體的抗病能力增強(qiáng)，從而加強(qiáng)了機(jī)體對入侵的病原菌的抑菌殺滅作用，該兩種中藥的作用機(jī)理也是這樣。當(dāng)然，這只是作用機(jī)理的一個方面，詳細(xì)過程還需進(jìn)一步通過試驗(yàn)研究得出。

4.3 中藥在治療傳染病方面，不易產(chǎn)生耐藥性，也無化學(xué)藥物殘留問題。因此，可以認(rèn)為這兩種中藥制劑在防治畜禽傳染病方面具有良好的應(yīng)用前景。

4.4 對清敗散和瀉痢康在治療動物傳染病方面的研究，為中藥制劑在治療動物及人類疾病方面提供了廣闊的發(fā)展前景。

參考文獻(xiàn)：

[1]甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)主編.獸醫(yī)微生物學(xué)[M].第二版.農(nóng)業(yè)出版社.1994.202-224.

[2]韓文瑜等主編. 病原細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)[M].吉林科學(xué)技術(shù)出版社.1992.

[3]劉學(xué)良，劉素玲.幾種中草藥對部分禽病原體的體外抑菌試驗(yàn)[J].中國獸藥雜志.1995（29）4：40-41.

郁有祝（1978-），男，講師，碩士.