張化濤 宋和平 宋曦晨
[摘要]探討尿液于化學(xué)分析結(jié)果的影響因素,提醒臨床醫(yī)師對(duì)尿液干化學(xué)分析結(jié)果的客觀使用及注意事項(xiàng)。從尿液干化學(xué)分析的項(xiàng)目及原理,闡述造成尿液分析結(jié)果的假陽(yáng)性及假陰性影響的各種因素。造成檢驗(yàn)結(jié)果假陽(yáng)性、假陰性的因素是多方面的。臨床醫(yī)師要指導(dǎo)患者正確留取尿液檢查標(biāo)本,在應(yīng)用檢查結(jié)果時(shí)要把影響因素考慮在內(nèi)。客觀地應(yīng)用檢查結(jié)果來(lái)分析病情。
[關(guān)鍵詞]尿液干化學(xué)分析;假陽(yáng)性;假陰性;質(zhì)量控制
[中圖分類(lèi)號(hào)]R115[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]C[文章編號(hào)]1674-4721(2009)05(b)-172-02
尿液分析儀的使用,使傳統(tǒng)意義上的尿常規(guī)檢查進(jìn)入了尿液分析的新時(shí)代,它操作簡(jiǎn)單、快速,多項(xiàng)目聯(lián)合檢測(cè),為臨床提供了更多的參考依據(jù)。但是,尿液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性受許多因素的影響,臨床醫(yī)師在使用其結(jié)果時(shí)應(yīng)有一個(gè)客觀的認(rèn)識(shí)。下面以筆者使用的尿十一項(xiàng)分析結(jié)果進(jìn)行說(shuō)明。儀器、干化學(xué)試紙條由深圳美僑醫(yī)療科技有限公司提供的Mejer-600Ⅱ型和十一項(xiàng)試條。
1測(cè)試項(xiàng)目及分析原理
測(cè)試項(xiàng)目有:葡萄糖、膽紅素、酮體、比重、隱血、pH、蛋白質(zhì)、亞硝酸鹽、白細(xì)胞、尿膽原及維生素C。采用于化學(xué)試帶法將多個(gè)測(cè)試項(xiàng)目固定在膠片試帶上,各自與尿中相應(yīng)成分獨(dú)立反應(yīng),顯示不同顏色。試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān),顏色越深,相應(yīng)某種成分濃度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也?。环粗?,反射率越大。即顏色的深淺與光的反射率成比例關(guān)系,而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系。因此,諸多影響顏色反應(yīng)的因素將影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2尿液分析結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰性
2.1尿葡萄糖檢查
尿試紙中的葡萄糖氧化酶作用于尿液中的葡萄糖,產(chǎn)生過(guò)氧化氫,試紙中的過(guò)氧化物酶再進(jìn)一步作用于過(guò)氧化氫,產(chǎn)生新生態(tài)氧,再與碘化鉀反應(yīng)產(chǎn)生顏色。當(dāng)尿液中含有干擾物質(zhì)抗壞血酸、L-多巴、原黑酸時(shí),可使尿糖結(jié)果假陰性,而過(guò)氧化氫、次氯酸鈉等氧化劑的混入,可使結(jié)果呈假陽(yáng)性。也應(yīng)注意由于試條儲(chǔ)存不當(dāng)造成的假陽(yáng)性,有資料表明:陰性標(biāo)本用保存不當(dāng)?shù)母苫瘜W(xué)試帶檢測(cè),有80%的試帶在暴露7 d后顯示弱陽(yáng)性。由于干化學(xué)法測(cè)定尿糖只是半定量,對(duì)于糖尿病的動(dòng)態(tài)觀察,當(dāng)出現(xiàn)陽(yáng)性時(shí),最好用濕化學(xué)定量方法,以便確立準(zhǔn)確的尿葡萄糖范圍。
2.2膽紅素、尿膽原檢查
它是一個(gè)重氮鹽反應(yīng)。主要受某些藥物的影響,如安替比林、冬眠靈、苯偶氮毗胺可使結(jié)果呈假陽(yáng)性。如果尿液中含有高濃度的抗壞血酸和亞硝酸鹽,可產(chǎn)生假陰性結(jié)果。因此臨床醫(yī)師在使用該結(jié)果時(shí)應(yīng)對(duì)患者的用藥情況有所了解。
2.3尿酮體檢查
酮體包括丙酮、乙酰乙酸、B-羥丁酸。前兩者易揮發(fā),若不能及時(shí)送檢可使測(cè)定結(jié)果偏低或假陰性,而某些藥物如頭孢菌素、PSP、BSP、二甲雙胍、酚噻嗪等可使酮體假陽(yáng)性,應(yīng)注意用藥情況。在用于酮體總量估計(jì)時(shí),應(yīng)注意在酮癥酸中毒早期,尿中酮體成分主要是β一羥丁酸,它不與試帶上模塊中的亞硝基鐵氫化物反應(yīng),使測(cè)定結(jié)果偏低,導(dǎo)致對(duì)酮體總量估計(jì)不足。
2.4尿比重檢查
主要反應(yīng)原理就是離子交換,化學(xué)顯色。其測(cè)定范圍過(guò)寬,且對(duì)過(guò)高過(guò)低的比重都不敏感,不能反應(yīng)尿細(xì)微的比重變化,只能做一般篩選,而不能用于尿濃縮稀釋實(shí)驗(yàn)。高濃度造影劑、蛋白質(zhì)存在可使結(jié)果偏高,在高濃度堿性尿中其測(cè)定值偏低,當(dāng)尿液pH值>7時(shí),應(yīng)在測(cè)定結(jié)果基礎(chǔ)上增加0.005,以作補(bǔ)償。
2.5尿隱血檢查
尿液中的血紅蛋白、紅細(xì)胞與試帶中的顯色物質(zhì)發(fā)生氧化反應(yīng),使模塊顯色。如尿液被次氯酸鹽、過(guò)氧化氫、碘化物等氧化物污染或肌紅蛋白尿、菌尿都可使隱血假陽(yáng)性。尿中抗壞血酸、亞硝酸鹽含量過(guò)高,可干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致隱血試驗(yàn)假陰性。而在腎病患者,紅細(xì)胞在腎或泌尿道破壞,或陳舊紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白溢出到尿中,文獻(xiàn)報(bào)道尿液在室溫下放置超過(guò)2 h對(duì)紅細(xì)胞技術(shù)和形態(tài)檢測(cè)有影響。尤其在第一次晨尿中pH、滲透壓變換很大,紅細(xì)胞易于變形和破溶,從而使干化學(xué)試帶法于顯微鏡鏡檢結(jié)果有差異,這時(shí)應(yīng)以鏡檢為準(zhǔn),但也要結(jié)合臨床作全面分析,必要時(shí)動(dòng)態(tài)觀察。
2.6尿pH檢查
尿pH反應(yīng)體內(nèi)酸堿代謝狀況,同時(shí)也影響著尿蛋白、尿比重測(cè)定。當(dāng)尿液放置過(guò)久,由于細(xì)菌的作用,可使尿液的pH發(fā)生堿性變化,所以檢查應(yīng)用新鮮尿。
2.7尿蛋白檢查
尿蛋白檢測(cè)主要針對(duì)的是白蛋白。指示劑為溴酚蘭。堿性尿(pH>8)或受到消毒殺菌劑污染,標(biāo)本內(nèi)混有生殖系統(tǒng)分泌物或含有較多的細(xì)胞成分以及大量青霉素的作用,均可導(dǎo)致蛋白假陽(yáng)性。在pH<3的酸性尿液中,蛋白可產(chǎn)生假陰性結(jié)果。因此應(yīng)注意尿液pH值對(duì)蛋白的影響。對(duì)于腎病患者,由于干化學(xué)法對(duì)球蛋白不敏感,需要系統(tǒng)觀察尿蛋白含量的病例應(yīng)進(jìn)行雙縮脲法定量檢測(cè)。
2.8尿亞硝酸鹽檢查
主要用于尿大腸埃希菌屬、克雷伯桿菌屬、變形桿菌屬和假單胞菌屬感染的檢測(cè)。尿液亞硝酸鹽檢出率受感染細(xì)菌是否含有硝酸鹽還原酶,食物中是否含有適量的硝酸鹽,尿液是否在膀胱中停留4 h以上或通過(guò)其他途徑使體內(nèi)含有適量的硝酸鹽三個(gè)條件的影響,反之結(jié)果可能呈陰性。如果尿中含有大量抗壞血酸,也可使結(jié)果呈假陰性。當(dāng)標(biāo)本放置過(guò)久,受空氣中的亞硝酸氣體污染,或服用某些泌尿止痛藥(如苯偶氮吡胺)等,可產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。因此,使用該結(jié)果時(shí)應(yīng)注意:陰性結(jié)果并不能排除細(xì)菌感染,像許多革蘭陽(yáng)性、陰性球菌、桿菌也已成為尿路感染的主要致病菌。陽(yáng)性結(jié)果也要排除藥物、亞硝酸鹽污染的可能。
2.9尿白細(xì)胞檢查
主要用于尿中中性粒細(xì)胞檢查,淋巴細(xì)胞不能檢出。中性粒細(xì)胞內(nèi)含有特異性酯酶,與試帶中的吲哚酚酯、重氮鹽反應(yīng),形成紫色縮合物。若尿中含有高濃度膽紅素或使用某些藥物(如呋喃坦啶),或尿中污染甲醛時(shí)均可產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。而高濃度糖尿、蛋白尿、苯酸或尿中含有大量先鋒Ⅳ、慶大霉素、四環(huán)素等藥物,會(huì)使反應(yīng)性能降低,導(dǎo)致結(jié)果偏低或假陰性。所以,試帶法不能替代鏡檢,以免漏診。當(dāng)出現(xiàn)干化學(xué)法與鏡檢結(jié)果不相符時(shí),應(yīng)考慮以上因素的影響,且二者實(shí)驗(yàn)原理不同,其報(bào)告方式也是兩種不同的概念。
2.10尿維生素C檢查
主要用于提示尿液隱血、膽紅素、亞硝酸鹽和葡萄糖檢查結(jié)果是否準(zhǔn)確,防止出現(xiàn)上述項(xiàng)目的假陰性。
3應(yīng)重視尿液分析前的質(zhì)控工作
一份準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報(bào)告單是臨床和檢驗(yàn)科共同努力的結(jié)果,尤其是分析前的樣本采集、用藥情況,臨床科室工作人員均應(yīng)充分了解。樣本要收集于清潔干燥的容器內(nèi),根據(jù)不同的目的收集不同時(shí)間、不同階段的尿。如晨尿,適宜住院患者,常用于篩查、直立性蛋白尿檢查和細(xì)胞學(xué)檢查;隨機(jī)尿,適用于常規(guī)及急診篩查,也可收集首次晨尿后2~4 h內(nèi)的二次晨尿,以提高細(xì)菌培養(yǎng)和有形成分的靈敏度;計(jì)時(shí)尿,3 h、12 h或24 h尿,常用于定量測(cè)定、廓清率實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞學(xué)檢查。但所有標(biāo)本要新鮮,及時(shí)送檢,從排出到檢測(cè)應(yīng)在2 h內(nèi)完成,否則會(huì)影響尿液化學(xué)成分及有形物質(zhì)的改變。因此臨床醫(yī)師要指導(dǎo)患者尿液標(biāo)本的正確留取,同時(shí)要把影響檢驗(yàn)結(jié)果的因素考慮在內(nèi),才能客觀有效地應(yīng)用檢驗(yàn)結(jié)果分析病情。