茄子耐低溫結(jié)果習(xí)性與內(nèi)源激素含量的分析研究

芮三亞成玉富王建忠

（1.南京市蔬菜科學(xué)研究所，江蘇南京，210036；2.揚(yáng)州大學(xué)）

茄子耐低溫結(jié)果習(xí)性與內(nèi)源激素含量的分析研究

芮三亞1成玉富2王建忠2

（1.南京市蔬菜科學(xué)研究所，江蘇南京，210036；2.揚(yáng)州大學(xué)）

對茄子耐低溫結(jié)果習(xí)性與內(nèi)源激素含量的進(jìn)行分析研究，結(jié)果表明，茄子耐低溫結(jié)實(shí)品系在生長點(diǎn)、花前子房及雄蕊中IAA、ZR、IPA、ABA含量較不耐低溫結(jié)實(shí)品種中的高，說明IAA、ZR、IPA、ABA含量與茄子的耐低溫性密切相關(guān)。

茄子 耐低溫結(jié)實(shí) 內(nèi)源激素

茄子是我國各地普遍栽培的蔬菜種類。隨著栽培方式的改變和人民生活水平的提高，生產(chǎn)者對耐低溫、耐弱光、耐高濕度的保護(hù)地栽培專用茄子品種的需求亦愈來愈高。在研究茄果類蔬菜的耐低溫性方面，對番茄和辣椒報(bào)道較多[1～6]。但在茄子方面報(bào)道較少[7]。本研究以耐低溫結(jié)實(shí)品系和不耐低溫結(jié)實(shí)品系為試驗(yàn)材料，分析了不同品系主要內(nèi)源激素含量的差異，探索不同內(nèi)源激素含量水平與耐低溫性的關(guān)系，以期為生產(chǎn)上應(yīng)用生長調(diào)節(jié)物質(zhì)來增強(qiáng)茄子的耐低溫結(jié)實(shí)性提供現(xiàn)實(shí)指導(dǎo)意義，并為茄子的耐低溫性育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

選擇在田間表現(xiàn)為耐低溫結(jié)實(shí)與不耐低溫結(jié)實(shí)的2種材料，耐低溫結(jié)實(shí)茄子品種為茄3，不耐低溫結(jié)實(shí)茄子品種為茄25。

鮮樣處理：選取2種材料適量的子房、生長點(diǎn)和雄蕊，在液氮中處理5～10 min，取出后放入-40℃的超低溫冰箱中保存。

1.2 試驗(yàn)方法

稱取0.2 g鮮樣，用液氮處理15 min后加2 mL樣品提取液，在冰浴下快速研磨成勻漿，轉(zhuǎn)入10 mL試管中，再用1 mL提取液將研缽沖洗干凈，洗液一并轉(zhuǎn)入試管中，沖洗2次。振蕩后放置在4℃冰箱內(nèi)。放置8 h，冷凍離心15 min（4000 r/min），取上清液。

過柱（C18小柱）：100%甲醇洗柱5～10 mL—80%甲醇平衡2 mL—上樣—100%甲醇洗柱5～10 mL—100%乙醚洗柱5～10 mL—100%甲醇洗柱5～10 mL，循環(huán)。

冷凍干燥：需冷凍干燥機(jī)。一般2.5 mL需10 h左右，要求液體全變成固態(tài)。

測定方法：酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）。

標(biāo)樣試劑盒：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)作物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

測定過程如下。包被：10 mL包被緩沖液加2.5 μL抗原（1∶4000），每孔100 μL。37℃水浴30 min后，拿出平衡2 min，甩掉包被液，按孔加洗滌液，平衡1 min，甩掉，洗板重復(fù)3次。

競爭：包被水浴過程中按2000，1000，500，250，125，62.5，31.25，0 ng/mL梯度配好標(biāo)樣。標(biāo)樣配好后立即配抗體：5 mL樣品稀釋液中加10 μL抗體。

加標(biāo)樣：在酶標(biāo)板前3列加標(biāo)樣，每孔50 μL。即從上往下，按濃度從高到低，每個(gè)濃度橫著加3次，形成3列梯度溶液。

加樣品：先混勻，每個(gè)樣品重復(fù)4次，按列加，每孔50 μL。

加抗體：先混勻，每孔加50 μL。37℃水浴30 min后，拿出平衡2 min，甩掉包被液，按孔加洗滌液，平衡1 min，甩掉，洗板重復(fù)4次。

加二抗：競爭水浴過程中即開始配二抗：10 mL樣品稀釋液中加10 μL二抗。

混勻后每孔100 μL，37℃水浴30 min后，拿出平衡2 min，甩掉包被液，按孔加洗滌液，平衡1 min，甩掉，洗板重復(fù)5次。

顯色：二抗水浴時(shí)配底物：10 mL底物緩沖液加0.01～0.02 g OPD，加30%H2O24 μL。每孔加100 μL，應(yīng)觀察到標(biāo)樣從上往下黃色逐漸加深，5～8 min后，加終止液，每孔50 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 IAA含量比較

由圖1可以看出，茄子在生長點(diǎn)、子房及雄蕊3個(gè)不同部位的IAA含量，茄3總體比茄25高。且生長點(diǎn)中IAA的含量要比子房及雄蕊中要高。說明耐低溫結(jié)實(shí)材料在生長初期IAA的含量比不耐低溫結(jié)實(shí)材料高。

圖1 茄子生長點(diǎn)、子房、雄蕊中IAA含量

圖2 茄子生長點(diǎn)、子房、雄蕊中ZR含量

圖3 茄子生長點(diǎn)、子房、雄蕊中IPA含量

圖4 茄子生長點(diǎn)、子房、雄蕊中ABA含量

2.2 ZR含量比較

由圖2可知，在生長點(diǎn)、花前子房及雄蕊3個(gè)不同部位的ZR含量，茄3總體比茄25高。且生長點(diǎn)中ZR的含量要比子房及雄蕊中高。說明耐低溫結(jié)實(shí)材料在生長初期ZR的含量比不耐低溫結(jié)實(shí)材料高。

2.3 IPA含量比較

由圖3可知，在生長點(diǎn)、花前子房及雄蕊3個(gè)不同部位的IPA含量，茄3總體比茄25高。說明耐低溫結(jié)實(shí)材料在生長初期IPA的含量比不耐低溫結(jié)實(shí)材料高。

2.4 ABA含量比較

由圖4可以看出，在生長點(diǎn)、花前子房及雄蕊3個(gè)不同部位的ABA含量，茄3總體比茄25高，特別是生長點(diǎn)和雄蕊中差異可達(dá)4～5倍。說明耐低溫結(jié)實(shí)材料在生長初期ABA的含量比不耐低溫性結(jié)實(shí)材料高。

有報(bào)道表明，零上低溫可引起煙草[9]、黃瓜[8]、玉米[10～11]等植物內(nèi)源ABA含量的增加；外施ABA同樣可以減緩或防止棉花[12]、黃瓜[13]以及煙草[14]的低溫傷害；在低溫鍛煉過程中伴隨著耐低溫性提高的同時(shí)，植物體內(nèi)源ABA含量上升，其含量耐低溫性強(qiáng)的植物高于耐低溫性弱的植物，這表明植物耐低溫性強(qiáng)弱與內(nèi)源ABA含量高低呈正相關(guān)。

3 結(jié)論

供試茄子耐低溫結(jié)實(shí)品種在生長點(diǎn)、花前子房及雄蕊中的IAA、ZR、IPA、ABA含量明顯高于不耐低溫結(jié)實(shí)品種，使其幼果在發(fā)育過程中產(chǎn)生了對低溫的適應(yīng)能力。從而使果實(shí)在低溫下得以繼續(xù)發(fā)育，表明IAA、ZR、IPA、ABA對茄子耐低溫結(jié)實(shí)有重要作用。

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Study on Fructification Habit in Low Temperature and Endogenous Hormone Analysis in Eggplant

RUI Sanya1,CHENG Yufu2,WANG Jianzhong2

The contents of IAA,ZR,IPA,ABA in meristem,ovary prior flowering and stamen in variety resistant to low temperature was higher than that in variety susceptible to low temperature.It suggest that IAA,ZR,IPA,ABA have the important effect on the fruit's growth.

Eggplant;Low-temperture-resistance;Fructification habit;Endogenous hormone

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.22.006

芮三亞（1964-），男，高級農(nóng)藝師，主要從事設(shè)施蔬菜栽培及農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作，電話：025-86575894，13951747648。E-mail：njscjcz@163.com

2009-07-28