髂內動脈灌注甲氨蝶呤在大鼠體內各組織藥物濃度監(jiān)測

毛姍

髂內動脈灌注甲氨蝶呤在大鼠體內各組織藥物濃度監(jiān)測

毛姍

目的 通過甲氨蝶呤(MTX)HPLC檢測法, 對大鼠髂內動脈灌注MTX后血漿以及組織內藥物濃度的變化進行檢測, 為臨床治療提供可靠參考。方.30只實驗室培養(yǎng)的健康雌性SD大鼠, 隨機分為對照組與觀察組, 各15只。觀察組按照3.0 mg/kg的劑量, 行髂內動脈注射MEX制劑；對照組以同樣劑量髂內靜脈注射MTX制劑。比較兩組大鼠的實驗效果。結果 兩組大鼠肺組織、子宮以及卵巢藥物濃度組間對比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論 通過髂內動脈灌注化療藥物, 能有效改善對子宮、卵巢組織的治療效果, 臨床應對此給予高度重視。

甲氨蝶呤；動脈灌注；藥物濃度

本文通過對髂內動脈灌注MTX在大鼠體內各組織藥物濃度監(jiān)測, 探討不同給藥方式大鼠血漿與組織中藥物動力學變化, 為進一步提高動脈給藥的安全性與有效性略盡綿力。

1 材料與方法

1.1 材料 選取實驗室培養(yǎng)的健康雌性SD大鼠30只, 隨機將大鼠均分為對照組與觀察組, 各15只。對照組大鼠體重250～350 mg, 平均體重(300.0±50.0)mg；對照組大鼠體重230～360 mg, 平均體重(295.0±55.0)mg。兩組大鼠一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 觀察組15只大鼠按照3.0 mg/kg的劑量, 行髂內動脈注射MEX制劑；對照組大鼠以同樣劑量髂內靜脈注射MTX制劑。具體操作為：給藥前, 對所有大鼠進行1.0 g/kg的烏拉坦腹腔注射, 待麻醉后固定大鼠, 并裝置SMUP-E型生物信號處理系統(tǒng), 用于監(jiān)測大鼠生命體征［1］。從大鼠下肢根部, 向腹股溝股動脈搏動處切開皮膚, 分離皮下組織后, 充分暴露股動脈與股靜脈。實施股動脈、股靜脈分離術后, 結扎股動脈遠心端, 并于近心端插管。灌注給藥后結扎動脈殘端并縫合傷口。手術結束后, 將大鼠放入恒溫箱內, 保持體溫。

檢測方法：心、肺、子宮組織解凍后精確稱重。按照1 g/ml的標準, 折算成體積后, 按照1：2的比例加入重蒸水充分混合, 搗成組織勻漿, 記錄勻漿重量。勻漿按照1 g/ml的標準折算成體積, 加入15%(V/V)高氯酸50 μl, 旋渦2 min

沉淀蛋白.12000 r/min離心10 min, 取上清液20 μl樣品進行HPLC分析。濃度超過線性范圍的樣品經準確稀釋后適當倍數(shù)后進樣。

色譜條件：色譜柱：Dikma Diamonsil C10(5 μm.200 mm×4.6 mm)；流動相：甲醇-0.05 mol/L醋酸銨緩沖液, 使用前需將pH值調節(jié)至6.0；流速：1.2 ml/min；紫外檢測波長暫定300 nm；柱溫：42℃；待見樣品進樣量：20 μl［2］。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據進行處理。計量資料用均數(shù)±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料用率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

對照組Mean大鼠給藥后15、30、45、60、75 min后肺組織藥物濃度依次為：(5.806±2.315)、(3.775±2.243)、(2.551±1 .512)、(1.887±1.638)、(0.801±0.459)μg/ml；觀察組Mean大鼠給藥15、30、45、60、75 min后肺組織藥物濃度依次為：(9.173±2.398)、(4.596±2.327)、(2.682±1.655)、(1.596.1.780)、(0.720±0.472)μg/ml。對照組SD大鼠給藥15、30、45、60、75 min后肺組織藥物濃度依次為：(2.118±1.692)、(0.691±0.485)、(0.533±0.330)、(0.522±0.159)、(0.145±0.080) μg/ml；觀察組SD大鼠給藥15、30、45、60、75 min后肺組織藥物濃度依次為：(2.004±1.531)、(1.487±0.568)、(0.444±0.299)、(0.327±0.128)、(0.037±0.020)μg/ml。

對照組Mean大鼠給藥15、30、45、60、75 min后子宮藥物濃度依次為：(14.586±8.153)、(8.332±6.268)、(8.332±6.245)、(1.384±0.259)、(0.558±0.318)μg/ml；觀察組Mean大鼠給藥15、30、45、60、75 min后子宮藥物濃度依次為：(10.427±6.458)、(5.140±4.125)、(1.369±0.857)、(0.206± 0.097)、1.003(±0.043)μg/ml。對照組SD大鼠給藥15、30、45、60、75 min后子宮藥物濃度依次為：(2.831±1.249)、(0.642±0.530)、(0.535±0.427)、(0.277±0.089)、(0.134±0.018) μg/ml；觀察組SD大鼠給藥15、30、45、60、75 min后子宮藥物濃度依次為：(1.253±0.981)、(2.664±1.462)、(0.361± 0.069)、(0.488±0.071)、(0.113±0.017)μg/ml。

對照組Mean大鼠給藥15、30、45、60、75 min后卵巢藥物濃度依次為：(4.882±2.498)、(1.357±0.925)、(0.127± 0.098)、(0.501±0.092)、(0.868±0.561)μg/ml；觀察組Mean大鼠給藥15、30、45、60、75 min后卵巢藥物濃度依次為：(4.379±2.981)、(3.952±1.658)、(2.088±1.925)、(1.241± 0.197)、(1.028±0.092)μg/ml。對照組SD大鼠給藥15、30、45、60、75 min后卵巢藥物濃度依次為：(0.598±0.095)、(0.452±0.027)、(0.130±0.029)、(0.168±0.928)、0.107 μg/ml；觀察組SD大鼠給藥15、30、45、60、75 min后卵巢藥物濃度依次為：(0.596±0.249)、(0.379±0.126)、(0.033±0.002)、(0.866±0.219)、(0.876±0.327)μg/ml。

兩組大鼠肺組織、子宮以及卵巢藥物濃度有明顯差異,其中觀察組肺組織、子宮以及卵巢藥物濃度明顯比對照組更高, 有效藥物濃度維持時間明顯更長, 兩組對比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

3 討論

本次試驗對甲氨蝶呤HPLC檢測方法的應用價值進行探究, 最終發(fā)現(xiàn), 該方法操作便捷, 靈敏度高, 檢測獲得數(shù)據精確可靠, 用于檢測體內血漿與組織的MTX藥物濃度, 能夠獲得預期效果。另外, 本組研究通過對大鼠股動脈插管髂內動脈與股靜脈插管灌注MTX, 充分證實了該方法的可行性, 使動脈介入治療的動物研究取得了新的進展。

經髂內動脈灌注MTX大鼠實驗最終發(fā)現(xiàn), 子宮與卵巢均具有理想的藥物濃集現(xiàn)象, 藥物在這部分組織的有效濃度持續(xù)時間會相對較長, 同時, 相較于全身靜脈化療, 髂內動脈化療在盆腔臟器的治療中優(yōu)勢更加明顯, 對肺部轉移病灶的治療也同樣發(fā)揮著重要作用。該研究結論與朱鯤鵬等［3］人報道內容基本一致。

綜上所述, 經本次研究最終發(fā)現(xiàn), 通過髂內動脈灌注化療藥物, 能有效改善對子宮、卵巢組織的治療效果。同時,對肺部病灶也能發(fā)揮出顯著的治療效果, 相較于全身靜脈給藥優(yōu)勢更為明顯, 臨床務必給予高度重視。

［1］ 劉健, 曹云祥, 朱艷.新風膠囊對佐劑性關節(jié)炎大鼠心功能及心肌超微結構影響.中國中西醫(yī)結合雜志.2012.23(11):1543-1548.

［2］ 段晶晶, 周婷, 徐峰.甲氨蝶呤在抑郁SD大鼠體內藥代動力學.今日藥學.2010.31(11):23-25.

［3］ 朱鯤鵬, 張嶺, 張曼, 等.重組羧肽酶G2對甲氨蝶呤在Wistar大鼠體內代謝特征的影響.藥物分析雜志.2013.15(5):763-769.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.20.210

2015-01-09］

473000 南陽醫(yī)學高等?？茖W校