穴敷扶正升白膏對(duì)多次化療小鼠造血及免疫系統(tǒng)的影響

曹大明　路　玫等

曹大明路玫趙喜新王憲齡高希言

(河南中醫(yī)學(xué)院,鄭州450003)

摘要在對(duì)小鼠進(jìn)行反復(fù)多次化療的同時(shí)給予扶正升白膏穴位涂敷,并設(shè)對(duì)照組進(jìn)行觀察。結(jié)果提示:穴敷扶正升白膏不僅能在化療后白細(xì)胞減少時(shí)使用,而且可以在化療的同時(shí)使用,以防止白細(xì)胞下降太快或減少過(guò)多,其機(jī)制是以保護(hù)骨髓造血細(xì)胞,減輕骨髓有核細(xì)胞的損失為基礎(chǔ)的。本法尚能減輕脾臟和胸腺的萎縮,因此可減輕化療對(duì)免疫器官的傷害,從而為穴涂扶正升白膏的臨床應(yīng)用提供科學(xué)客觀的依據(jù)。

主題詞化療反應(yīng)/穴位療法白細(xì)胞減少/穴位療法胸腺/藥物作用脾/藥物作用穴位貼敷法

我們通過(guò)對(duì)化療后白細(xì)胞下降患者和對(duì)環(huán)磷酰胺(CY)大劑量(150 mg/kg)一次腹腔注射造成白細(xì)胞減少的小鼠應(yīng)用自制的扶正升白膏穴敷,均收到顯著的扶正升白效果,且證明治療機(jī)理是相近的。那么能否在化療的同時(shí)采用穴涂扶正升白膏,以預(yù)防白細(xì)胞下降過(guò)多或減輕化療藥物對(duì)免疫器官的損傷呢?為此我們又觀察了該療法對(duì)反復(fù)多次化療小鼠造血及免疫系統(tǒng)的影響,現(xiàn)總結(jié)如下。

1材料與方法

1.1動(dòng)物選擇及分組

選用普通級(jí)雄性昆明種(KM)小鼠,體重為20±1 g,籠養(yǎng)3天適應(yīng)環(huán)境后,臨時(shí)標(biāo)記后檢查外周血白細(xì)胞總數(shù),由高到低排序,刪除兩級(jí)小鼠保留24只,依據(jù)分層隨機(jī)分組法分為A、B兩組,每組12只,隨機(jī)確定A為CY加穴敷扶正升白膏(治療)組,B為CY對(duì)照組。

1.2治療處理及模型制備

(1)對(duì)各組小鼠用推子剃除背部"大椎"和脊柱兩側(cè)"膈俞"至"腎俞"處的鼠毛。

(2)按60 mg/kg的劑量于第1,3,5,7,10天對(duì)每只小鼠腹腔注射CY 1次。CY用生理鹽水配制成5 mg/ml。

(3)從第1次注CY后立刻開(kāi)始,每天上午8點(diǎn),在A組小鼠剃毛處的"大椎"、"膈俞"、"脾俞"、"胃俞"、"腎俞"等處,涂敷扶正升白膏(人參、當(dāng)歸、丁香、肉桂、冰片等藥物研極細(xì)末,姜汁調(diào)糊),B組在相同部位涂敷淀粉糊,下午2點(diǎn)將藥膏擦去,連續(xù)11次。

1.3檢測(cè)指標(biāo)及方法

(1)*"外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù):各組小鼠從分組開(kāi)始,每天在涂敷前,固定專(zhuān)人割尾靜脈采血20 μl,加入0.38 ml的白細(xì)胞稀釋液中,搖勻,靜置3 min,查外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù),連續(xù)12次。

(2)*"外周血白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù):各組小鼠于第12天測(cè)白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。

(3)*"股骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù):各組小鼠于第12天摘眼球放血處死后,取一根股骨用4號(hào)注射針頭吸取3%醋酸溶液10 ml沖洗股骨內(nèi)全部有核細(xì)胞于溶液內(nèi),繼用顯微鏡計(jì)數(shù)全骨腔內(nèi)有核細(xì)胞總數(shù)。

(4)*"骨髓細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù):各組小鼠于第12天處死后,用胸骨鑷壓擠出骨髓,沾一小滴鼠血清混勻,作骨髓涂片,經(jīng)甲醇固定,用瑞氏染色分類(lèi)計(jì)數(shù)。

(5)*"脾臟系數(shù):第12天小鼠稱(chēng)重處死后,摘取脾臟,即刻稱(chēng)重并計(jì)算脾臟系數(shù)(脾重/體重=mg/g)。

(6)*"胸腺系數(shù):第12天小鼠稱(chēng)重處死后,摘取胸腺,即刻稱(chēng)重并計(jì)算胸腺系數(shù)(胸腺重/體重=mg/g)。

2結(jié)果及分析

2.1小鼠多次化療期間穴敷扶正升白膏對(duì)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響(見(jiàn)表1)

表1數(shù)據(jù)顯示,A、B兩組在同一時(shí)間進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)差異比較,治療組白細(xì)胞下降較少,與對(duì)照組相比除第5天和第10天差異不太顯著(P>0.05)外,其余各天均有顯著(P<0.05)和非常顯著(P<0.01)性差異,由此說(shuō)明,短期內(nèi)對(duì)小鼠反復(fù)化療的同時(shí)用扶正升白膏涂敷能夠防止白細(xì)胞下降,減輕化療對(duì)造血的損傷。

2.2小鼠多次化療期間穴敷扶正升白膏對(duì)外周血白細(xì)胞分類(lèi)的影響(見(jiàn)表2)

由表2可見(jiàn),治療組與對(duì)照組白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)經(jīng)t檢驗(yàn),均為P>0.05,提示各類(lèi)白細(xì)胞沒(méi)有差異。參照正常組動(dòng)物白細(xì)胞的分類(lèi),發(fā)現(xiàn)反復(fù)多次化療中性粒系百分比相應(yīng)增多,淋巴相對(duì)減少,治療組僅稍?xún)?yōu)于對(duì)照組。

2.3小鼠多次化療期間涂敷扶正升白膏對(duì)股骨髓有核細(xì)胞總數(shù)及骨髓細(xì)胞分類(lèi)的影響(見(jiàn)表3)

表3所示為最后一次注CY的第3天檢測(cè)的數(shù)據(jù),根據(jù)文獻(xiàn)^[1],動(dòng)態(tài)的分析骨髓細(xì)胞注CY后的變化,此時(shí)骨髓細(xì)胞尚未大量增生,治療組骨髓有核細(xì)胞較對(duì)照組多(P<0.001),說(shuō)明在反復(fù)化療的同時(shí)用扶正升白膏穴位涂敷,保護(hù)了骨髓有核細(xì)胞,這是治療組外周血白細(xì)胞損失較輕的基礎(chǔ)。骨髓細(xì)胞分類(lèi)的數(shù)據(jù)說(shuō)明治療組與對(duì)照組在粒細(xì)胞的晚幼、桿狀核、分葉核的百分比差異有非常顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示白細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化的機(jī)制是比較復(fù)雜的。

2.4小鼠多次化療期間涂敷扶正升白膏對(duì)脾臟和胸腺系統(tǒng)的影響(見(jiàn)表4)

脾臟系數(shù),治療組>對(duì)照組(P<0.05),可以證明在多次化療期間涂敷扶正升白膏能夠減輕脾臟的萎縮(正常小鼠脾臟系數(shù)6.67±1.49見(jiàn)課題實(shí)驗(yàn)Ⅱ)。

胸腺系數(shù),同樣呈現(xiàn)治療組>對(duì)照組(P<0.01),說(shuō)明涂敷扶正升白膏可以減輕小鼠多次化療期間胸腺的萎縮(正常小鼠胸腺系數(shù)4.2±0.61)。

3討論

臨床上接受化療的腫瘤患者,在白細(xì)胞減少的同時(shí),多表現(xiàn)為脾腎兩虛、氣血雙虧的臨床癥狀。我們根據(jù)腎為先天之本,主骨生髓,主藏精;脾胃為后天之本、氣血生化之源等理論,擬調(diào)理脾胃,補(bǔ)腎填髓,益氣生血,扶正固本的治療原則,選用脾俞、胃俞、足三里以調(diào)理脾胃,和胃止嘔,使脾胃功能強(qiáng)健,水谷精微化源充足,氣血得以補(bǔ)益;取腎俞溫腎益腎,補(bǔ)骨生髓,以利精血之化生;取血會(huì)膈俞,以補(bǔ)血和血;取督脈與六陽(yáng)經(jīng)之交會(huì)穴大椎宣通諸陽(yáng)經(jīng)氣,增強(qiáng)機(jī)體功能。扶正升白膏由人參、當(dāng)歸、丁香、肉桂、冰片等藥物組成,諸藥合用可達(dá)補(bǔ)益氣血,溫補(bǔ)脾腎,透達(dá)經(jīng)絡(luò)之目的。

本研究結(jié)果提示:①穴敷扶正升白膏不僅能在化療后白細(xì)胞減少時(shí)使用,而且可以在化療的同時(shí)使用,從而起到防止化療時(shí)外周血白細(xì)胞下降太快或減少過(guò)多的作用。②本方法的升白或減輕白細(xì)胞下降的機(jī)制是以保護(hù)骨髓造血細(xì)胞,減輕骨髓有核細(xì)胞的損失為基礎(chǔ)的。③化療的同時(shí)使用本法能夠減輕脾臟和胸腺的萎縮,因此可以減輕化療對(duì)免疫器官的傷害。

該結(jié)果佐證了臨床研究的結(jié)論,說(shuō)明穴敷扶正升白膏對(duì)化療后白細(xì)胞減少的患者是一種療效確切、安全可靠、操作方便的治療方法,具有很好的實(shí)用價(jià)值。

4參考文獻(xiàn)

1趙喜新.針灸對(duì)化療小鼠白細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化的影響.河南中醫(yī),1996;16(4):216

(收稿日期:1999-08-13,齊淑蘭發(fā)稿)