• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的“檳榔-草果-厚樸”配伍治療糖尿病腎病作用機(jī)制探討

    2022-02-14 05:53:16白曉甜宋超群劉世林
    中醫(yī)藥通報(bào) 2022年2期
    關(guān)鍵詞:草果檳榔靶點(diǎn)

    白曉甜 南 征 宋超群 劉世林

    糖尿病腎?。―iabetic kidney disease,DKD)是臨床常見的糖尿病并發(fā)癥。2019 年流行病學(xué)調(diào)查顯示[1],全球20~70 歲成年人中糖尿病發(fā)病率高達(dá)9.3%,而DKD 患病人數(shù)隨糖尿病發(fā)病率升高也成比例增長。DKD 以持續(xù)性蛋白尿和腎功能進(jìn)行性下降為主要表現(xiàn),并且多伴有高血壓和眼底病變,最后進(jìn)展為終末期腎病。研究顯示,DKD為發(fā)達(dá)國家和地區(qū)終末期腎病的首要原因。對于此病,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)多從降血糖、降血壓、降血脂、抗炎、抗氧化應(yīng)激等方面治療[2]。中醫(yī)藥在此病的治療上發(fā)揮了其獨(dú)特優(yōu)勢[3]。尚鑫等[4]應(yīng)用參芪地黃湯治療早期糖尿病腎病,患者SCR、BUN、UAER等指標(biāo)均較治療前明顯改善。王澤等[5]研究發(fā)現(xiàn)六味地黃丸可降血糖、血壓、血脂,改善腎功能,對于肝腎陰虛型糖尿病腎病療效確切。吳修紅等[6]將當(dāng)歸補(bǔ)血湯加味用于糖尿病腎病的治療,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其可明顯改善患者腎功能,增強(qiáng)患者免疫機(jī)能并且減輕機(jī)體炎癥反應(yīng)。南征教授將“檳榔-草果-厚樸”三藥應(yīng)用于糖尿病腎病的治療,經(jīng)過多年臨床實(shí)踐,收獲良效。

    本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法[7],從檳榔、草果、厚樸三味藥的成分及作用靶點(diǎn)出發(fā),分析其治療糖尿病腎病的作用機(jī)制,為導(dǎo)師南征教授運(yùn)用此三味藥治療本病提供相關(guān)佐證,并為糖尿病腎病的治療提供相關(guān)理論參考。

    1 資料與方法

    1.1 藥物成分篩選及其靶點(diǎn)收集和規(guī)范應(yīng)用TCMSP 平 臺(Traditional Chinese Medicine Systems Pharamacology Database and Analysis Platform)對檳榔、草果、厚樸三味中藥化學(xué)成分進(jìn)行搜索,并根據(jù)ADME 參數(shù)進(jìn)行篩選,保留口服生物利用度(OB)≥30%同時(shí)類藥性(DL)≥0.18的活性成分。同時(shí)通過查閱三味藥物治療糖尿病腎病有關(guān)資料補(bǔ)充相關(guān)活性成分。最后通過TCMSP 平臺收集活性成分作用靶點(diǎn),并通過UniProt數(shù)據(jù)庫對相關(guān)靶點(diǎn)名稱進(jìn)行規(guī)范。

    1.2 構(gòu)建藥物-成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)將藥物、成分、靶點(diǎn)相關(guān)信息導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2 軟件,繪制藥物-成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖,并根據(jù)degree 值提取相關(guān)性強(qiáng)的活性成分。

    1.3 疾病靶點(diǎn)收集和規(guī)范應(yīng)用GeneCards、DrugBank、OMIM、TTD 四個(gè)數(shù)據(jù)庫,以糖尿病腎病為主題詞進(jìn)行檢索,收集、篩選并匯集糖尿病腎病中相關(guān)基因,同樣用UniProt數(shù)據(jù)庫規(guī)范相關(guān)靶點(diǎn)名稱。

    1.4 確定藥物與疾病的交集靶點(diǎn)將收集好的藥物相關(guān)靶點(diǎn)和疾病相關(guān)靶點(diǎn)導(dǎo)入網(wǎng)站(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/),繪 制Venny圖,獲取“檳榔-草果-厚樸”藥對與糖尿病腎病的交集靶點(diǎn)。

    1.5 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建將所獲取的藥物與疾病的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 11.0 平臺(https://www.string-db.org/),將物種設(shè)定為“Homo sapiens”,設(shè)定最小互相作用值(minimum required interaction score)>0.9,其余設(shè)置為默認(rèn)值,獲取蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)(PPI網(wǎng)絡(luò)),并將網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)處理。

    1.6 藥物與疾病靶點(diǎn)功能與通路富集分析將檳榔、草果、厚樸三味藥物治療糖尿病腎病的靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID 數(shù)據(jù)庫(https://david.ncifcrf.gov/),選擇物種為Homo sapiens 進(jìn)行生物學(xué)功能及通路的富集分析,并應(yīng)用相關(guān)平臺(http://www.bioinformatics.com.cn/)對數(shù)據(jù)進(jìn)行可視化。

    1.7 藥物活性成分-疾病-靶點(diǎn)-通絡(luò)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建應(yīng)用Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建檳榔、草果、厚樸成分-糖尿病腎病-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)。

    2 結(jié)果

    2.1 藥物活性成分靶點(diǎn)獲取通過TCMSP 平臺,初步獲得檳榔化學(xué)成分52 種,篩選之后獲得8 種;初步獲得草果化學(xué)成分59 種,篩選后獲得8 種;初步獲得厚樸化學(xué)成分139 種,篩選后獲得2 種。因篩選具有相關(guān)局限性,故通過收集相關(guān)文獻(xiàn)補(bǔ)充檳榔成分1種,厚樸成分2 種。經(jīng)過篩選和補(bǔ)充,三藥的主要成分包括槲皮素(quercetin)、和厚樸酚(honokiol)、厚樸酚(Magnolol)、(+)-表兒茶素(ent-Epicatechin)、原花青素B1(Procyanidin B1)等,具體成分見表1。通過對成分的再次檢索,獲得檳榔、草果、厚樸活性成分對應(yīng)的靶點(diǎn)分別為41 個(gè)、174 個(gè)和94 個(gè),三藥靶點(diǎn)匯集并去重后共獲得靶點(diǎn)191個(gè)。

    表1 檳榔-草果-厚樸三藥主要成分表

    2.2 藥物成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖制作根據(jù)藥物成分及靶點(diǎn)制作相關(guān)network 文件和type 文件,并將文件導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件,繪制藥物-成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖,見圖1。通過軟件內(nèi)置Network Analyzer,根據(jù)degree 值提取位于前十的活性成分為槲皮素(quercetin)、和厚樸 酚(honokiol)、厚 樸 酚(Magnolol)、桉 葉 油 醇(Eucalyptol)、(+)-表兒茶素(ent-Epicatechin)、(-)-兒茶素[(-)-catechin]、原花青素B1(Procyanidin B1)、鄰苯二甲酸二己酯(WLN:6OVR BVO6)、(4E,6E)-1,7-二(4-羥基苯基)-4,6-庚二烯-3-酮[(4E,6E)-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)hepta-4,6-dien-3-one]、新 橙 皮 苷(Neohesperidin)。主要成分degree值見表2。

    圖1 藥物-成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

    表2 關(guān)鍵成分degree值表

    2.3 疾病相關(guān)靶點(diǎn)獲取從GeneCards 數(shù)據(jù)庫中獲取糖尿病腎病靶點(diǎn)3459個(gè),設(shè)定Score>中位數(shù)后獲取靶點(diǎn)1751 個(gè),通過DrugBank、OMIM、TTD 三個(gè)數(shù)據(jù)庫對糖尿病腎病靶點(diǎn)進(jìn)行補(bǔ)充,經(jīng)過匯總?cè)ブ貜?fù)值后共獲得糖尿病腎病靶點(diǎn)1784個(gè)。

    2.4 藥物與疾病的交集靶點(diǎn)獲取將藥物靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)分別導(dǎo)入相關(guān)網(wǎng)站(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/Venn/),繪制藥物疾病靶點(diǎn)交集Venny 圖,見圖2,并獲取藥物與疾病的交集靶點(diǎn),共115個(gè)。

    圖2 檳榔-草果-厚樸與糖尿病腎病交集靶點(diǎn)Venny圖

    2.5 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建將所獲取的藥物與疾病的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 11.0 平臺,經(jīng)過最小互相作用值>0.9 篩選后獲得靶點(diǎn)104 個(gè),并構(gòu)建蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)(PPI 網(wǎng)絡(luò)),并將網(wǎng)絡(luò)導(dǎo)入Cytoscape 軟件,利用軟件的NetworkAnalyzer功能對網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析,使PPI網(wǎng)絡(luò)圖中的節(jié)點(diǎn)根據(jù)degree值呈現(xiàn)大小與顏色深淺的變化(節(jié)點(diǎn)越大、顏色越深表示degree 值高),見圖3。再根據(jù)degree值排序獲得藥物作用于疾病的關(guān)鍵靶點(diǎn)為AKT1、MAPK1、TP53、IL6、VEGFA等。

    圖3 “檳榔-草果-厚樸”糖尿病腎病靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)圖

    2.6 生物學(xué)功能與通路富集分析將檳榔-草果-厚樸與糖尿病腎病交集靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行生物學(xué)功能及通路的富集分析,并對結(jié)果進(jìn)行可視化,如圖4~圖7。

    圖4~圖7 藥物治療疾病靶點(diǎn)功能與通路的富集分析圖

    2.7 藥物成分-疾病-靶點(diǎn)-通絡(luò)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建制作成分、疾病、靶點(diǎn)、通路相關(guān)network 文件和type 文件,導(dǎo)入Cytoscape軟件構(gòu)建藥物成分-疾病-靶點(diǎn)-通絡(luò)網(wǎng)絡(luò)圖,同樣使用Network Analyzer 功能對網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析,使PPI 網(wǎng)絡(luò)圖中的節(jié)點(diǎn)根據(jù)degree 值呈現(xiàn)大小與顏色深淺的變化(節(jié)點(diǎn)越大、顏色越深表示degree值越高),見圖8??芍?,關(guān)鍵靶點(diǎn)為AKT1、MAPK1、TP53、IL6、VEGFA;關(guān)鍵 通 路為PI3K-Akt、HIF-1、MAPK、FoxO等信號通路。

    圖8 成分-疾病-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖

    3 討論

    3.1 “檳榔-草果-厚樸”的作用檳榔為達(dá)原飲之君藥,草果、厚樸為達(dá)原飲之臣藥,三藥共同構(gòu)成了達(dá)原飲開達(dá)膜原、辟穢化濁的基礎(chǔ)。檳榔是棕櫚科植物檳榔的干燥成熟種子[8],功能殺蟲、行氣、利水、消積、截瘧。草果為姜科植物草果的干燥成熟果實(shí),有燥濕溫中、截瘧除痰之功效。厚樸為木蘭科植物厚樸的干燥干皮、根皮、枝皮,可行氣燥濕消痰、下氣除滿平喘。三藥皆為辛溫之藥,相輔相成,功效顯著。檳榔雖歸經(jīng)于陽明[9],其疏利之性卻能透腸胃、搜膜原;草果雖歸于脾經(jīng),其烈性卻可透脾臟達(dá)膜原;厚樸行氣散結(jié)之力強(qiáng),可在兩藥引導(dǎo)之下直擊伏于膜原之邪并導(dǎo)之以出。歷代醫(yī)家多應(yīng)用達(dá)原飲治療瘧疾、疫戾之病?,F(xiàn)代醫(yī)家在此基礎(chǔ)上,將達(dá)原飲應(yīng)用于更廣泛的領(lǐng)域。楊進(jìn)教授[10]將達(dá)原飲的治療思路運(yùn)用到多種疾病的治療上,將檳榔、草果、厚樸三藥應(yīng)用于濕濁郁閉三焦之口腔潰瘍、干燥綜合征等。吳耀南[11]運(yùn)用達(dá)原飲治療慢性肝病,認(rèn)為此病為邪氣伏于膜原,故從膜原論治。陳蓓華[12]以檳榔、草果、厚樸為主藥治療小兒病毒性腦炎,總有效率達(dá)90.5%。林霜霜[13]還將達(dá)原飲加減應(yīng)用于小兒腸系膜淋巴結(jié)炎。在新型冠狀病毒肺炎的治療上,余漢先[14]認(rèn)為,達(dá)原飲能祛胸中膜原之邪,若理化檢查符合肺外帶、肺下葉毛玻璃影等指征時(shí)可以達(dá)原飲為底方進(jìn)行治療,對患者病情有顯著的改善作用。田和炳[15]將檳榔、草果、厚樸作為新型冠狀病毒肺炎瘥后防復(fù)的宣透方,以達(dá)膜原清透余邪,改善瘥后不適癥狀。

    “膜原”一詞最早見于《黃帝內(nèi)經(jīng)》,其廣泛分布在人體,內(nèi)與臟腑相連,外與體表相通,并與三焦有關(guān)。明代吳又可在《溫疫論》提出疫戾邪氣從口鼻侵犯人體,病位不在臟腑和經(jīng)絡(luò),而為半表半里之膜原,并運(yùn)用達(dá)原飲開達(dá)膜原、辟穢化濁以治療瘟疫之氣伏于膜原[16]。南征教授在繼承膜原理論的基礎(chǔ)上,結(jié)合多年臨床經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為,膜原非獨(dú)疫病可侵入,頑固、穢濁之邪同樣可入膜原[17]。消渴腎病是由于消渴日久,臟腑功能失常,毒邪伏于膜原,損傷腎絡(luò)所致,關(guān)鍵病機(jī)為毒損腎絡(luò)。本病之毒邪深藏膜原,故藥難及,邪難出。所以在治療時(shí)運(yùn)用“達(dá)膜原”的方法,用達(dá)原飲中三味主藥檳榔、草果、厚樸,其中檳榔辛散化濁,厚樸行氣散結(jié),草果芳香辟穢。三藥合用可直達(dá)膜原,使深伏之毒邪潰敗,祛毒邪外出,在本病的治療上發(fā)揮了重要作用。

    3.2 “檳榔-草果-厚樸”的藥理學(xué)分析現(xiàn)代藥理研究顯示,檳榔的成分有生物堿、酚類、氨基酸、維生素等[18]。具體成分包括原花青素A1、原花青素B1等,這類物質(zhì)具有良好的抗氧化作用,可以應(yīng)用于氧化應(yīng)激損傷造成的多種慢性疾病。袁列江等[19]在研究檳榔提取物時(shí)發(fā)現(xiàn),不同提取方式提取的檳榔活性成分均能在抗氧化方面發(fā)揮相應(yīng)作用。姚起鑫等[20]研究發(fā)現(xiàn)檳榔堿能夠調(diào)節(jié)糖代謝及脂代謝,其降糖原理是減少肝臟糖異生。草果中含有多種活性成分[21],如酚類、黃酮、揮發(fā)油、花青素以及微量元素等,揮發(fā)油為其主要成分,草果揮發(fā)油[22]的兩種成分可協(xié)同促進(jìn)細(xì)胞凋亡和抗腫瘤。草果甲醇提取物具有抗氧化活性作用,還可降低甘油三酯和血糖。厚樸的化學(xué)成分[23]主要為酚性化合物及揮發(fā)油等。厚樸酚、和厚樸酚為主要酚類活性物質(zhì),可明顯改善機(jī)體糖脂代謝,同時(shí)抗炎、抗氧化,和厚樸酚還有治療腹瀉、抗抑郁、降血糖的作用。厚樸揮發(fā)油(主要為桉葉油醇)及黃酮等成分也有良好的抗炎、抗氧化作用。

    以往對檳榔、草果、厚樸單獨(dú)的藥理研究很多,但對于三藥共同作用的研究相對缺乏,其對糖尿病腎病治療方面的藥理研究也相對匱乏。本研究通過對檳榔、草果、厚樸三藥的活性成分如槲皮素、和厚樸酚、厚樸酚、(+)-表兒茶素、原花青素B1等的分析,找到其治療糖尿病腎病的相關(guān)靶點(diǎn)共115個(gè),主要有AKT1、MAPK1、TP53、IL6、VEGFA 等,經(jīng)過通路與生物進(jìn)程分析找到三藥發(fā)揮作用的生物學(xué)通路主要是PI3KAkt、HIF-1、MAPK、FoxO等信號通路。相關(guān)具體分析如下。

    3.2.1 藥物活性成分分析 槲皮素為黃酮類化合物,生物活性及藥用價(jià)值都很高,具有抗炎、抗氧化的作用,對糖尿病腎病有很好的療效。靳麗英等[24]通過研究發(fā)現(xiàn)槲皮素可通過增強(qiáng)podocin4(足突蛋白)及nephrin(腎病蛋白)的表達(dá),減少糖尿病腎病足細(xì)胞損傷,從而降低蛋白尿。宋其蔓等[25]研究發(fā)現(xiàn)槲皮素可激活PI3K-Akt 信號通路,從而在糖尿病腎病患者的治療上起到抗氧化應(yīng)激、抑制細(xì)胞凋亡以及增強(qiáng)細(xì)胞活力的作用。和厚樸酚為厚樸中含有的小分子多酚[26],吳芳等[27]研究發(fā)現(xiàn)和厚樸酚具有抗炎、抗菌、抗氧化的作用,對于糖尿病腎病的氧化應(yīng)激損傷具有切實(shí)的治療作用。厚樸酚對GK大鼠糖尿病腎病模型有一定的保護(hù)作用[28],可降低血糖并降低血漿胰島素,降低尿蛋白,同時(shí)降低內(nèi)生肌酐清除率。(+)-表兒茶素[29]是一種兒茶素和多酚,具有抗氧化活性。原花青素B1[30]是8種原花青素中活性最強(qiáng)的,可清除有毒自由基,并且有抗炎、降血脂等功用,可抑制炎癥反應(yīng),減輕細(xì)胞損傷,可預(yù)防和治療長期炎癥導(dǎo)致的慢性疾病,如糖尿病及其并發(fā)癥如糖尿病腎病。

    3.2.2 關(guān)鍵靶點(diǎn)分析 AKT1 是AKT 激酶的一種。AKT 可介導(dǎo)葡萄糖的攝取和調(diào)節(jié)[31]。AKT1 調(diào)節(jié)許多過程,包括細(xì)胞存活、增殖、代謝、生長等[32]。MAPK1是MAP 激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的重要組成部分,可介導(dǎo)多種生物學(xué)功能,如細(xì)胞生長、黏附、存活和分化[33]。TP53誘導(dǎo)的TRGAR[34](凋亡調(diào)節(jié)因子)可維持細(xì)胞氧化還原穩(wěn)態(tài)、調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)葡萄糖代謝。IL6參與免疫、組織再生和新陳代謝,可在組織損傷期間進(jìn)行宿主防御,并可通過GLP-1 介導(dǎo)提高胰島素敏感性,以適應(yīng)胰島素需求的變化[35]。陳麗萍等[36]研究發(fā)現(xiàn),IL6與糖尿病腎病炎性因子相關(guān)。IL6 可協(xié)調(diào)胰島素需求,但過量會損傷胰島細(xì)胞,且會刺激腎小球膜細(xì)胞增生。VEGFA 可誘導(dǎo)血管通透性增加并抑制細(xì)胞凋亡[37]。VEGF 升高可促使血管內(nèi)皮功能損傷,并損傷腎臟基質(zhì)及其上皮細(xì)胞[38]。

    3.2.3 主要通路及功能分析 在糖尿病腎病中,PI3K-Akt 信號通路是一條重要的免疫炎癥機(jī)制通路[39],可防止細(xì)胞凋亡、加快細(xì)胞增殖,在疾病進(jìn)展過程中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn),PI3K-Akt信號通路過度激活與本病的發(fā)生密切相關(guān)[40]。HIF-1信號通路可改善缺氧[41],但也可對本病起到促進(jìn)作用。在糖尿病腎病早期,HIF-1 信號通路主要起保護(hù)作用,但在糖尿病腎病不斷進(jìn)展的過程中,其誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡作用會引起腎臟受損。MAPK 信號通路能對細(xì)胞的代謝凋亡產(chǎn)生調(diào)控作用,可影響組織細(xì)胞糖代謝,從而影響本病進(jìn)展[42]。FoxO 信號通路對葡萄糖產(chǎn)物的基因轉(zhuǎn)錄起到促進(jìn)作用,但是FoxO 依賴的轉(zhuǎn)錄如果增強(qiáng)也會起反向作用,如引發(fā)高血糖。

    綜上所述,本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法,對“檳榔-草果-厚樸”藥對治療糖尿病腎病的相關(guān)藥理機(jī)制進(jìn)行了初步探究,研究結(jié)果初步預(yù)測了三味藥成分對應(yīng)的靶點(diǎn)作用于本病的相關(guān)機(jī)制,為進(jìn)一步將膜原理論應(yīng)用于DKD 的治療提供了先導(dǎo)信息和基礎(chǔ),也為網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究其它方藥的作用機(jī)制提供相應(yīng)借鑒。

    猜你喜歡
    草果檳榔靶點(diǎn)
    維生素D受體或是糖尿病治療的新靶點(diǎn)
    中老年保健(2021年3期)2021-12-03 02:32:25
    不同烘干方式對怒江草果產(chǎn)品質(zhì)量的影響
    有利有害的檳榔
    腫瘤免疫治療發(fā)現(xiàn)新潛在靶點(diǎn)
    讀書文摘(2017年10期)2017-10-16 14:26:57
    夢回檳榔園
    民族音樂(2016年1期)2016-08-28 20:02:52
    滇東南山區(qū)天然林下草果種植的民族生態(tài)學(xué)評價(jià)
    心力衰竭的分子重構(gòu)機(jī)制及其潛在的治療靶點(diǎn)
    氯胺酮依賴腦內(nèi)作用靶點(diǎn)的可視化研究
    同位素(2014年2期)2014-04-16 04:57:16
    檳榔果實(shí)脂溶性化學(xué)成分的GC-MS分析
    97碰自拍视频| 国产高清视频在线播放一区| 欧美在线黄色| 51午夜福利影视在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲自拍偷在线| 亚洲熟妇熟女久久| 久9热在线精品视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 男女下面进入的视频免费午夜| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产精品 国内视频| 国产单亲对白刺激| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 最近视频中文字幕2019在线8| 一级作爱视频免费观看| 人妻久久中文字幕网| 又黄又粗又硬又大视频| 日本与韩国留学比较| 九九热线精品视视频播放| 国产淫片久久久久久久久 | 久久九九热精品免费| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产一区二区三区视频了| 国产主播在线观看一区二区| a在线观看视频网站| 日本三级黄在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲自拍偷在线| 极品教师在线免费播放| 成熟少妇高潮喷水视频| 在线观看66精品国产| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 69av精品久久久久久| 婷婷丁香在线五月| av福利片在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆 | 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久久久久久午夜电影| 亚洲欧美激情综合另类| 看黄色毛片网站| 国产乱人视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲国产看品久久| 亚洲精华国产精华精| 午夜成年电影在线免费观看| 国产极品精品免费视频能看的| 黄片小视频在线播放| 最近最新免费中文字幕在线| 久久久久久久久免费视频了| 午夜福利高清视频| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产成人欧美在线观看| 欧美日韩精品网址| 亚洲,欧美精品.| 国产成人影院久久av| 中文字幕最新亚洲高清| av在线蜜桃| 五月玫瑰六月丁香| 俺也久久电影网| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品福利观看| 国产精品,欧美在线| 中国美女看黄片| 精品久久久久久久久久久久久| 国产精品一区二区精品视频观看| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精华一区二区三区| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲电影在线观看av| 在线永久观看黄色视频| 最近在线观看免费完整版| 精品国内亚洲2022精品成人| 老熟妇仑乱视频hdxx| 丰满的人妻完整版| 亚洲性夜色夜夜综合| 熟女人妻精品中文字幕| 美女扒开内裤让男人捅视频| 手机成人av网站| 一a级毛片在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 99久久精品国产亚洲精品| 91在线观看av| 国产精品久久久av美女十八| 亚洲精华国产精华精| www.精华液| 一级黄色大片毛片| 一二三四社区在线视频社区8| 1024手机看黄色片| 怎么达到女性高潮| av在线蜜桃| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 午夜精品久久久久久毛片777| 制服人妻中文乱码| 精品电影一区二区在线| 亚洲无线在线观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 一级毛片高清免费大全| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产单亲对白刺激| 日韩中文字幕欧美一区二区| 久久久久久久午夜电影| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美不卡视频在线免费观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 操出白浆在线播放| 日本熟妇午夜| 国产99白浆流出| 国产一区二区在线观看日韩 | 精品日产1卡2卡| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 校园春色视频在线观看| 免费在线观看日本一区| 亚洲色图av天堂| 2021天堂中文幕一二区在线观| 一二三四社区在线视频社区8| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美中文日本在线观看视频| 午夜久久久久精精品| 波多野结衣巨乳人妻| 成人特级黄色片久久久久久久| av国产免费在线观看| 九九热线精品视视频播放| 免费观看的影片在线观看| 校园春色视频在线观看| 91在线观看av| 午夜福利高清视频| 国产成年人精品一区二区| 免费搜索国产男女视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美高清成人免费视频www| 国产高潮美女av| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 天堂网av新在线| 一进一出抽搐gif免费好疼| 露出奶头的视频| 91麻豆av在线| 两个人的视频大全免费| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 日日夜夜操网爽| 午夜免费成人在线视频| www.www免费av| 免费在线观看日本一区| 国产不卡一卡二| www.www免费av| 免费一级毛片在线播放高清视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 这个男人来自地球电影免费观看| 校园春色视频在线观看| 亚洲av五月六月丁香网| 五月伊人婷婷丁香| 制服丝袜大香蕉在线| 久久久久性生活片| 两个人看的免费小视频| 亚洲无线观看免费| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲国产色片| 国产精品免费一区二区三区在线| 一区二区三区激情视频| 亚洲精品色激情综合| 久9热在线精品视频| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久久久人人人人人| 国产一区二区在线av高清观看| 熟女人妻精品中文字幕| 人人妻人人看人人澡| 亚洲成av人片免费观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 天堂网av新在线| 999久久久精品免费观看国产| 哪里可以看免费的av片| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 一个人看视频在线观看www免费 | 亚洲av成人av| av天堂中文字幕网| 黑人操中国人逼视频| 午夜两性在线视频| 88av欧美| 两性夫妻黄色片| 99热精品在线国产| 日韩精品青青久久久久久| 欧美日韩乱码在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲中文av在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 在线a可以看的网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 最近在线观看免费完整版| 91在线观看av| 岛国视频午夜一区免费看| 欧美日韩福利视频一区二区| 婷婷亚洲欧美| 国产一区二区激情短视频| 久久久国产成人精品二区| 国产精品99久久99久久久不卡| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 久久草成人影院| 在线a可以看的网站| 亚洲国产欧美人成| av黄色大香蕉| 久久久国产欧美日韩av| 成年人黄色毛片网站| 久久久久久久久中文| 久久国产乱子伦精品免费另类| 在线观看午夜福利视频| 国产午夜精品论理片| 在线永久观看黄色视频| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 真实男女啪啪啪动态图| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 十八禁人妻一区二区| 一a级毛片在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 一级毛片女人18水好多| 久久这里只有精品中国| 国产日本99.免费观看| 一级黄色大片毛片| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产成+人综合+亚洲专区| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 精品电影一区二区在线| 又大又爽又粗| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产成人av教育| 欧美日韩精品网址| 嫩草影院精品99| 在线播放国产精品三级| 色在线成人网| 欧美日韩一级在线毛片| 九九在线视频观看精品| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲第一电影网av| 国产男靠女视频免费网站| a在线观看视频网站| 欧美日韩国产亚洲二区| 久久久久久国产a免费观看| 欧美极品一区二区三区四区| 欧美又色又爽又黄视频| 99在线视频只有这里精品首页| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 两个人看的免费小视频| 午夜a级毛片| 无人区码免费观看不卡| av福利片在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 少妇的逼水好多| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 女警被强在线播放| 久久精品91蜜桃| 性色av乱码一区二区三区2| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 啦啦啦免费观看视频1| 国产真实乱freesex| 亚洲色图av天堂| or卡值多少钱| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| www国产在线视频色| 久久草成人影院| 色综合欧美亚洲国产小说| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久久久性生活片| 一本精品99久久精品77| 国产亚洲精品av在线| 亚洲国产高清在线一区二区三| av中文乱码字幕在线| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲性夜色夜夜综合| 最近最新免费中文字幕在线| 99久久精品国产亚洲精品| 久久国产精品人妻蜜桃| 激情在线观看视频在线高清| 午夜福利在线在线| av欧美777| 亚洲人与动物交配视频| 国内精品美女久久久久久| 国产成人精品久久二区二区91| 一级毛片高清免费大全| 亚洲精品美女久久av网站| 伦理电影免费视频| 啦啦啦免费观看视频1| 在线免费观看不下载黄p国产 | 99久久精品热视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 日本免费一区二区三区高清不卡| 日本一二三区视频观看| 在线观看66精品国产| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 可以在线观看的亚洲视频| 小说图片视频综合网站| 久久久久久久精品吃奶| 免费看光身美女| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产激情欧美一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| svipshipincom国产片| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 三级毛片av免费| 国产99白浆流出| 中国美女看黄片| 国内精品一区二区在线观看| 欧美日韩乱码在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 搞女人的毛片| 一区二区三区激情视频| 制服丝袜大香蕉在线| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲人成伊人成综合网2020| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 人人妻人人看人人澡| 欧美三级亚洲精品| 九九热线精品视视频播放| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 少妇的逼水好多| av在线蜜桃| 九色成人免费人妻av| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲一区二区三区不卡视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 美女cb高潮喷水在线观看 | 男人舔奶头视频| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲第一电影网av| 国产高清视频在线播放一区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 在线免费观看不下载黄p国产 | 99久国产av精品| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国语自产精品视频在线第100页| av国产免费在线观看| 国产av不卡久久| 一级作爱视频免费观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产午夜福利久久久久久| 精品国产三级普通话版| 最近最新免费中文字幕在线| 在线播放国产精品三级| 在线a可以看的网站| 国产私拍福利视频在线观看| 国产精品 国内视频| 午夜福利成人在线免费观看| 国产一区在线观看成人免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 97碰自拍视频| 99在线视频只有这里精品首页| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日本 欧美在线| 白带黄色成豆腐渣| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 一本久久中文字幕| 三级国产精品欧美在线观看 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 在线免费观看不下载黄p国产 | 色尼玛亚洲综合影院| 最新中文字幕久久久久 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 少妇的丰满在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 人人妻人人澡欧美一区二区| 性欧美人与动物交配| 亚洲美女黄片视频| 亚洲国产色片| 97碰自拍视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 成年人黄色毛片网站| 国语自产精品视频在线第100页| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 中文字幕最新亚洲高清| 欧美在线黄色| www.精华液| 热99在线观看视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久热在线av| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 免费在线观看日本一区| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产精品野战在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲无线在线观看| 国产免费男女视频| 欧美zozozo另类| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产成人影院久久av| 亚洲中文字幕日韩| 99在线视频只有这里精品首页| 欧美一区二区精品小视频在线| 黄频高清免费视频| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产精品久久久久久精品电影| 婷婷亚洲欧美| 国产视频一区二区在线看| 久久香蕉国产精品| 欧美国产日韩亚洲一区| 日本与韩国留学比较| 欧美色视频一区免费| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| av在线天堂中文字幕| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产高清激情床上av| 两人在一起打扑克的视频| 国产精品综合久久久久久久免费| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 男女床上黄色一级片免费看| 成人18禁在线播放| 精品久久久久久,| 午夜激情福利司机影院| 一进一出抽搐gif免费好疼| 99riav亚洲国产免费| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 欧美成人性av电影在线观看| 免费av不卡在线播放| 亚洲成av人片免费观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产精品亚洲av一区麻豆| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产三级黄色录像| 免费看光身美女| 久久精品91无色码中文字幕| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 三级毛片av免费| 成人三级黄色视频| 精品久久久久久久久久久久久| 97超视频在线观看视频| 中文字幕久久专区| 国产精品av久久久久免费| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲第一电影网av| 国产av在哪里看| 99精品久久久久人妻精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产成人aa在线观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 一本久久中文字幕| 国产视频一区二区在线看| 午夜福利免费观看在线| xxx96com| 午夜免费观看网址| 久99久视频精品免费| 日本黄色视频三级网站网址| 中国美女看黄片| 老司机在亚洲福利影院| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久久久免费精品人妻一区二区| 哪里可以看免费的av片| 国产激情久久老熟女| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| avwww免费| 美女 人体艺术 gogo| 黑人操中国人逼视频| 亚洲无线在线观看| 久久伊人香网站| 在线视频色国产色| 亚洲人与动物交配视频| 黄色 视频免费看| 美女cb高潮喷水在线观看 | 国产精品香港三级国产av潘金莲| 性欧美人与动物交配| 国产精品综合久久久久久久免费| 午夜福利视频1000在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 看黄色毛片网站| 国产精品,欧美在线| www.精华液| 国产又色又爽无遮挡免费看| 欧美中文日本在线观看视频| 欧美又色又爽又黄视频| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲精品在线美女| 精品无人区乱码1区二区| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 黄色成人免费大全| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲片人在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美日韩综合久久久久久 | 岛国在线观看网站| 国产亚洲精品久久久com| 国产乱人视频| 99热这里只有精品一区 | 久久这里只有精品中国| 99久久精品一区二区三区| 欧美zozozo另类| 黄色 视频免费看| 免费看日本二区| 久久久久久久久久黄片| 亚洲无线观看免费| 禁无遮挡网站| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲av成人精品一区久久| 99国产综合亚洲精品| 麻豆成人av在线观看| bbb黄色大片| 热99在线观看视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 免费人成视频x8x8入口观看| 成人av一区二区三区在线看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产免费男女视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲国产精品sss在线观看| 91老司机精品| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 免费无遮挡裸体视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 免费观看的影片在线观看| 日本与韩国留学比较| 真实男女啪啪啪动态图| 午夜亚洲福利在线播放| av在线蜜桃| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲国产欧美人成| 亚洲专区国产一区二区| 国产日本99.免费观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 999精品在线视频| 中出人妻视频一区二区| 日韩三级视频一区二区三区| 手机成人av网站| 操出白浆在线播放| 国产精品久久久人人做人人爽| 9191精品国产免费久久| 这个男人来自地球电影免费观看| 久久精品人妻少妇| 亚洲天堂国产精品一区在线| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲一区二区三区色噜噜| 成熟少妇高潮喷水视频| 视频区欧美日本亚洲| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲av免费在线观看| 757午夜福利合集在线观看| 日韩有码中文字幕| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 欧美日韩精品网址| 黄色片一级片一级黄色片| 欧美午夜高清在线| 一本综合久久免费| 久9热在线精品视频| 少妇丰满av| 日韩欧美在线乱码| 国产亚洲精品久久久com| 国产一区在线观看成人免费| 一区二区三区国产精品乱码| 久久中文字幕人妻熟女| 曰老女人黄片| 亚洲成av人片免费观看| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲片人在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 美女午夜性视频免费| 国产成人啪精品午夜网站| 天堂动漫精品| 亚洲av片天天在线观看| 51午夜福利影视在线观看| h日本视频在线播放| 1024手机看黄色片| 嫩草影视91久久| 婷婷丁香在线五月| www.999成人在线观看| 特级一级黄色大片| 成人无遮挡网站| www.自偷自拍.com| 精品久久久久久成人av| 床上黄色一级片| 国产成人精品久久二区二区免费| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲一区二区三区色噜噜| 免费在线观看成人毛片| 久久国产乱子伦精品免费另类| 色视频www国产| 99re在线观看精品视频| 在线播放国产精品三级| 亚洲精品美女久久av网站| 中文字幕高清在线视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 欧美日韩精品网址| 午夜精品在线福利| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 免费看日本二区|